土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.ppt

㈤.微生物的培养与观察在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌：30～37℃培养1～2d放线菌：25～28℃培养5～7d霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。菌落的特征包括形状、大小、隆起程度、颜色等方面第22页,共49页，2024年2月25日，星期天微生物的培养与观察第23页,共49页，2024年2月25日，星期天操作提示[一]无菌操作1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。3、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。[二]做好标记注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。[三]规划时间第24页,共49页，2024年2月25日，星期天三.结果分析与评价1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。第25页,共49页，2024年2月25日，星期天五.课外延伸在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。第26页,共49页，2024年2月25日，星期天课题延伸CO（NH2）2+H2O CO2+2NH3脲酶pH升高指示剂（酚红）将变红第27页,共49页，2024年2月25日，星期天测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。第28页,共49页，2024年2月25日，星期天大肠杆菌呈黑色中心,有或无金属光泽大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB)上典型特征第29页,共49页，2024年2月25日，星期天本课题知识小结:第30页,共49页，2024年2月25日，星期天1.使用选择培养基的目的是（）A.培养细菌B.培养真菌C.使需要的微生物大量繁殖D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素实践训练CD第31页,共49页，2024年2月25日，星期天3.下列说法不正确的是（）A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。4.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（）A.较多的氮源物质B.较多的碳源物质 C.青霉素类药物D.高浓度食盐BC第32页,共49页，2024年2月25日，星期天(2008年高考广东卷)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株。筛选的主要步骤如下图所示：①为土壤样品。请回答下列问题：(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入作为碳源。②中不同浓度碳源的培养基______(A.影响；B.不影响)细菌的数量。如果要测定②中活细菌数量，常采用法。苯酚A稀释涂布平板第33页,共49页，2024年2月25日，星期天(2)④为对照，微生物在④中不生长、在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于；使用________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？④不含苯酚，⑤以苯酚为唯一碳源平板划线避免培养过程产生的水分影响微生物的生用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量第34页,共49页，2024年2月25日，星期天请根据以上配方，回答下列问题：(1)该培养基含有微生物所需要的_____类营养物质。其中最主要的碳源