石蜡切片的制作及HE染色课件.pptxVIP

石蜡切片的制作及HE染色课件

石蜡切片制作简介

石蜡切片制作过程

HE染色原理及步骤

石蜡切片HE染色结果分析

石蜡切片制作及HE染色注意事项

contents

目

录

01

石蜡切片制作简介

将生物组织固定、脱水后，用石蜡包埋，经过切片机制成薄片，再进行染色等处理，最后制成可以在显微镜下观察的样本。

包括组织取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和贴片等步骤。

石蜡切片是病理学诊断和研究中最常用的技术之一，广泛应用于医学、生物学等领域。

02

石蜡切片制作过程

选取适当的组织块，要求大小适中、有代表性。

取材

将组织块迅速放入固定液中，以防止组织自溶和腐败。

固定

将组织块中的水分逐渐脱去，以便于后续的浸蜡和包埋。

使组织块变得透明，以便于后续的切片和观察。

透明

脱水

浸蜡

将组织块放入熔化的石蜡中，使其被石蜡完全浸没。

包埋

将组织块用石蜡包埋，形成一整块石蜡块，以便于后续的切片。

切片

将石蜡块切成薄片，要求厚度均匀、无裂痕。

贴片

将切好的薄片贴在载玻片上，以便于后续的染色和观察。

03

HE染色原理及步骤

HE染色是一种常用的组织学染色方法，用于显示组织结构和细胞形态，以便病理医生进行疾病诊断。

HE染色利用苏木精和伊红两种染料对组织进行染色，苏木精能够与细胞核中的DNA结合，使细胞核呈现蓝色；伊红能够与细胞质结合，使细胞质呈现红色。

01

02

伊红染料是一种酸性染料，能够与碱性物质结合，如蛋白质。当伊红进入细胞质后，与蛋白质结合，使细胞质呈现红色。

苏木精染料是一种碱性染料，能够与酸性物质结合，如DNA。当苏木精进入细胞核后，与DNA结合，使细胞核呈现蓝色。

水化

将脱蜡后的切片放入水中，使组织完全水化。

脱蜡

将石蜡切片放入二甲苯中脱蜡5-10分钟，然后使用无水乙醇冲洗两次，每次2分钟。

苏木精染色

将切片放入苏木精染液中染色5-10分钟，然后使用盐酸酒精分化液分化，再用自来水冲洗。

封片

将染色后的切片用中性树胶封片，并放在显微镜下观察。

伊红染色

将切片放入伊红染液中染色5分钟，然后使用自来水冲洗。

04

石蜡切片HE染色结果分析

细胞核是细胞最重要的组成部分之一，染色后呈深蓝色，是辨识细胞类型和状态的重要依据。

细胞核

细胞质染色后呈粉红色，其染色深浅和质地的细腻程度可以反映细胞的代谢活跃程度。

细胞质

某些细胞器在HE染色后可以显现出特殊的形态和颜色，如线粒体、内质网等，有助于对细胞进行更深入的结构辨识。

细胞器

炎症诊断

炎症细胞的种类和数量是炎症诊断的重要依据，如淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞等在HE染色后的形态和分布特点。

肿瘤诊断

通过观察肿瘤组织在石蜡切片HE染色后的形态、染色深浅、细胞排列方式等特点，可以初步判断肿瘤的性质和类型。

鉴别良恶性肿瘤

良恶性肿瘤在石蜡切片HE染色后通常表现出不同的形态和染色特点，病理医生可以通过观察这些特点对肿瘤进行良恶性鉴别。

05

石蜡切片制作及HE染色注意事项

确保实验室通风系统良好，避免有毒气体积累。

实验室安全

个人防护

废弃物处理

穿戴实验服、化学防护眼镜、化学防护手套等。

按照实验室规定正确处理废弃物。

03

02

01

按照标准操作规程配制试剂，确保准确性和一致性。

试剂配制

试剂应存放在阴凉、干燥、避光的地方，避免交叉污染和挥发。

试剂保存

按照设备操作手册进行操作，避免因误操作导致设备损坏或安全事故。

设备操作

定期对设备进行维护和保养，确保设备正常运行和使用寿命。

设备维护

THANKS。