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中南大学学报(医学版)
2022,47(11)http://
1504JCentSouthUniv(MedSci)
:
DOI10.11817/j.issn.1672-7347.2022.220057
PVA缩甲醛吸水海绵在无创宫腔液取样和RNA检测中的
安全性与可行性
1,2231,2
黄曦,李艳萍,李丽娅,何爱桦
(1.中南大学湘雅三医院生殖医学中心,长沙410013;2.中南大学湘雅医院生殖医学中心,长沙410008;
3.中南大学粉末冶金研究院,长沙410017)
[摘要]目的:宫腔液RNA可用作检测子宫内膜容受性,但目前仍没有无创取样方法。聚乙烯醇(polyvinyl
alcohol,PVA)缩甲醛吸水海绵作为一种医用生物吸水海绵,具有良好的吸水性和亲生物性,可用于开发新型无创宫腔
液取样器。本研究旨在探讨PVA缩甲醛吸水海绵对子宫内膜上皮细胞的毒性及对宫腔液RNA测序(RNAsequencing,
RNA-Seq)的影响。方法:使用PVA缩甲醛吸水海绵的细胞为实验组,包括0.005%、0.01%及0.02%(w/v)的悬液组以
及0.01%、0.05%及0.1%(v/v)的浸提液组,对照组仅添加完全培养基,空白组无添加。采用体外细胞毒性实验测量每
组细胞的存活率。招募2019年11月至2020年1月在中南大学湘雅医院生殖医学中心进行体外受精术的8例患者,采
集患者的宫腔液,实验组将宫腔液用无菌PVA缩甲醛吸水海绵吸入后再置入RNA-later保存液中,对照组直接放入等
量RNA-later保存液中,随后进行RNA-Seq及数据分析。结果:体外细胞毒性实验结果显示:0.005%浓度悬液组各
培养时间的细胞存活率差异无统计学意义(P=0.255);0.01%和0.02%浓度悬液组在12h内各培养时间的细胞存活率差
异无统计学意义(均P0.05),24h与0h相比细胞存活率下降(分别P0.01,P0.05)。在同一培养时间下,3个浓度梯
度的悬液组细胞存活率均比对照组低(均P0.05),其中0.005%浓度悬液组培养至24h时细胞存活率下降幅度小于
30%,0.01%浓度悬液组在12h时细胞存活率下降幅度大于30%,0.02%浓度悬液组在0h时下降幅度大于30%。
0.01%浓度浸提液组在6h内各培养时间的细胞存活率差异无统计学意义(均P0.05),12h、24h与0h组相比细胞存
活率下降(均P0.01);0.05%浓度浸提液组在12h内各培养时间的细胞存活率差异无统计学意义(均P0.05),24h与
0h相比存活率下降(P0.05);0.1%浓度浸提液组中各培养时间的细胞存活率差异无统计学意义(P=0.082)。在同一培
养时间下,0.01%浓度浸提液组在0,3及24h与对照组细胞存活率的差异均无统计学意义(均P0.05);除了3h之外,
0.05%组与0.1%组的细胞存活率均较对照组下降(均P0.05),下降幅度均小于30%。宫腔液RNA-Seq结果显示:实
验组与对照组RNA的外显子率、基因检测数量、转录本检测数量差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:PVA缩甲
醛吸水海绵对人子宫内膜上皮细胞的毒性作用符合国家要求的医用材料细胞毒性标准,用其进行宫腔液取样行RNA-
Seq,不影响测序结果,表明PVA缩甲醛吸水海绵应用于无创宫腔液取样及RNA检测安全可行。
[关键词]P
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