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枯草芽孢杆菌的发酵

学院：化工学院

专业：生物工程

班级：生物10-2

姓名：

摘要

枯草芽孢杆菌是我国农业部允许作为饲料添加剂的15种菌种之一,其已被

越来越多地制成饲用微生态制剂。因其制剂是无毒、无残留、无污染的“绿色”

添加剂，故具有宽阔的进展前景，并已在畜牧业、饲料业广泛应用，显示巨大的

社会效益和生态效益。通过摇床培育筛选出较适宜于枯草芽孢杆菌发酵的培育基配

方，发酵培育基配方确定后，在摇床条件下，通过对温度、初始ｐＨ值、初始接

种量、装液量、摇床转速等发酵条件的摸索，确定最正确发酵条件。在摇瓶条件

下优化发酵培育基和发酵工艺后，承受发酵罐进展发酵培育，对枯草芽孢杆菌在液

体发酵过程中的菌体数量、ｐＨ值、总糖含量和总氮含量四个因素随时间的变化

进展了观看。

枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着

色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5

微米，椭圆到柱状，位于菌体中心或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落外表粗

糙不透亮，污白色或微黄色。枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多

粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些物质对致病菌或内源性感染的条

件致病菌有明显的抑制作用。枯草芽孢杆菌快速消耗环境中的游离氧，造成肠道低

氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值，间接抑制其

它致病菌生长。枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维

素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用，能合成维生素B1

、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性，在饲

料中应用广泛。它还可以用来改善水质，应用在污水处理和环境保护中。和其它微生

物混合使用，还可以用于生物肥料和土地改进等

关键词：枯草芽孢杆菌生长发酵活菌数

第一章材料与方法

1.1材料

1.1.1菌种

枯草芽孢杆菌

1.1.2培育基

（1）LB培育基：蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl10g，蒸馏水1000ml，pH为7，

〔可溶性淀粉20g〕琼脂20g。

（2）筛选用培育基：含有2%可溶性淀粉的LB培育基。

〔3〕种子培育基：豆饼粉4%，玉米粉3%，NaHPO0.8%，(NH)SO0.4%

24424

，NHCl0.15%，HO。

42

〔4〕发酵培育基：豆饼粉5.6%，玉米粉7.2%，NaHPO0.8%，(NH)SO0.4%

24424

，NHCl0.13%，CaCl0.13%，α—淀粉酶50g。

42

1.1.3主要试剂

蔗糖、葡萄糖、淀粉、玉米淀粉、麦芽糖、酵母浸出物、胰蛋白胨、牛肉膏、尿

素、氯化铵、硫酸锰、硫酸镁、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、硫酸亚铁、氯化钠和

氯化钙。

1.1.4仪器设备

控温摇床、高压蒸气灭菌锅、电子天平、pH测定仪、无菌操作台和紫外分光光

度计。

1.2方法

1.2.1培育基的制备

(1)称量

按培育基配比依次准确地称取酵母膏、NaCl、蛋白胨放入烧杯中，并在烧杯

中参加少量蒸馏水。注：酵母膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或外表皿中称量，用

热水溶化后倒入烧杯，也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如略微加

热，酵母膏便会与称量纸分别，然后马上取出纸片。

(2)溶化

可溶性淀粉溶液的配制方法：将所需克数的可溶性淀粉放入一个小烧杯中，

参加少量蒸馏水，搅拌成糊状，然后将糊状溶液均匀倒入少于培育基总体积的沸水

中，一边搅拌一边加热，待其溶化成透亮状后连续在电炉上加热5分即制成可溶性

淀粉溶液。