染色体步移讲解.pdf

2023/5/222:10染色体步移

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染色体步移

染色体步移（GenomeWalking）可以克隆已知序列的侧翼未知序列，基于PCR技术的染色体步移技术先后有十几种方法，目前最常使用的是TAIL-PCR（Thermal

AsymmetricInterlacedPCR，热不对称交错PCR）技术，利用特异性套嵌引物，结合简并引物钓取侧翼序列。

背景说明

染色体步移（GenomeWalking）可以克隆已知序列的侧翼未知序列，基于PCR技术的染色体步移技术先后有十几种方法，目前最常使用的是

TAIL-PCR（ThermalAsymmetricInterlacedPCR，热不对称交错PCR）技术，利用特异性套嵌引物，结合简并引物钓取侧翼序列。其基本原理是利

用目标序列旁的已知序列设计3个嵌套的特异引物（SP1，SP2，SP3），用它们分别和1个具有低Tm值的短的随机简并引物（AD）相结合，根据引

物的长短和特异性的差异设计不对称的温度循环，通过分级反应来扩增特异产物。TAIL-PCR技术简单、快速、特异性高、反应产物准确可靠、重复

性好，因此深受广大科研工作者的喜爱。

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图TAIL-PCR原理示意图

服务流程

客户在线下单—订单/实验材料确认—引物设计—DNA提取—PCR扩增—测序鉴定—上传检测结果

服务内容及说明

适用场景

1、根据已知的DNA序列连续步移，获取物种中完整的基因序列或重要序列，用于基因功能研究；

2、鉴定T-DNA或转座子的插入位点，鉴定转基因技术所带来的外源基因的插入位点等；

3、用于染色体测序工作中的空隙填补，获得完整的基因组序列；

4、用于人工染色体PAC、YAC和BAC的片段搭接。

优势特点

1、拥有丰富的设计简并性引物的实验经验；

2、可以与我司转基因服务、检测服务、蛋白服务等衔接，整个实验可以畅通且快速地完成。

实验周期

根据下单时填写的实验信息自动预测

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客户下单及项目信息填写

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在我司官网/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写项目名称，选择项目类型、项目所需要的具体信息，价格由系统自动计

算。

实验信息

在实验开始、结题关键节点系统会自动发送短信到申请人手机进行告知，实验过程中客户可以随时登录客户管理系统査看项目实时进展情况。实验结

题后，实验报告、检测结果可在线査看，并永久保留。实验过程用到的菌株、载体、受体材料免费为客户保存半年后销毁。

实验交付内容

1、实验报告：引物信息、实验过程、PCR产物凝胶图片、目标序列；

2、测序结果：实验相关的全部测序文件。