提高缺氧耐受力功能评价方法及修订说明.pdf

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提高缺氧耐受力功能评价方法〔征求意见稿〕

保健食品评价试验工程、试验原则及结果判定

Items,PrinciplesandResultAssessment

1试验工

1.1体重

1.2常压耐缺氧实验：存活时间

1.3常压缺氧模型实验：红细胞数和血红蛋白，丙二醛〔MDA〕，总抗氧化能力

〔T-AOC〕

1.4亚硝酸钠中毒缺氧实验：

缺氧损伤实验:高铁血红蛋白含量〔MetHb〕

1.4.2缺氧存活实验:存活时间

2试验原则

所列指标均为必做工

3结果判定

3.1常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒缺氧实验、常压缺氧模型实验三项实验中任

两项结果阳性可判定受试样品具有提高缺氧耐受力功能。

3.2其中缺氧存活实验、缺氧损伤实验的结果均为阳性可判定亚硝酸钠中毒缺氧

实验结果阳性。

提高缺氧耐受力功能检验方法

MethodfortheAssessmentof

EnhancingAno*iaEnduranceFunction

1.常压耐缺氧实验

1.1原理

缺氧对机体是一种紧性刺激，影响机体各种代，特别是影响机体的氧化供能，

最终会导致机体的心、脑等主要器官缺氧供能缺乏而死亡。

1.2材料

250mL磨口瓶、秒表、凡士林、钠石灰〔或等量氢氧化钠和碳酸钙〕。

1.3实验动物

推荐用近交系成年小鼠，单一性别，小鼠体重18－22克，每组10-15只。

1.4实验方法

1.4.1剂量和分组

至少设三个剂量组，同时设对照组。以人体推荐量的10倍为其中的一个剂

量组，另设两个剂量组，最高剂量不得超过人体推荐量的30倍。

1.4.2受试样品的给予

经口灌胃给予受试样品，无法灌胃时将受试样品掺入饲料，并记录每只动物

的饲料摄入量。受试样品给予时间30天，必要时可以延长至45天。

1.4.3实验步骤

每日经口灌胃给予受试样品，对照组给予纯洁水。将动物每周称重两次，按

体重调整给予受试样品的量。各组于末次灌胃后1小时，将各组小鼠分别放入盛

有5g钠石灰的250mL磨口瓶〔每瓶1只〕，用凡士林封瓶口，盖严，使之不漏

气，立即计时，以呼吸停顿为指标，记录小鼠死亡的时间。

1.4.4检测指标

小鼠因缺氧而死亡的时间。

1.5数据处理

数据采用方差分析，但需按方差分析的程序先进展方差齐性检验，方差齐，

计算F值，F值F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值F0.05，用多个实

验组和一个对照组间均数的两两比拟方法进展统计；对非正态或方差不齐的数据

进展适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进展统计；

假设变量转换后仍未到达正态或方差齐的目的，改用秩和检验进展统计。

1.6结果判定

受试样品组与对照组比拟，存活时间延长，并具有统计学意义，则判定该实

验结果阳性。

1.7考前须知：

每个磨口瓶只放1只小鼠。

磨口瓶一定要密闭封严，以防漏气，否则会影响实验结果。

磨口瓶必须等容量(误差1ml)，实验前先用水加以校正。

每批实验动物的体重应尽量保持一致。

2常压缺氧损伤模型实验

2.1原理

在总大气压保持不变的情况下，降低空气中氧的百分含量，机体吸入氧量降

低，导致血液中氧含量降低，组织细胞不能从血液中获得充足的氧而使能量代障

碍，导致重要脏器组织细胞的损伤。

2.2仪器

低氧分压呼吸效应实验系统、血细胞分析仪、可见光分光光度计、酶标仪、

微量加样器、恒温水浴锅、普通离心机、混旋器、具塞离心管、组织匀浆器。

2.3实验动物

推荐用近交系成年小鼠，单一性别，体重18－22g，每组10-15只。

2.4实验方法

2.4.1剂量和分组

至少设三个剂量组，同时设阴性对照组和模型对照组二个对照组。以人体推

荐量的10倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，最高剂量不得超过人体推

荐量的30倍。

2.4.2受试样品的给予

经口灌胃给予受试样品，受试样品给予时间30天，必要时可以延长至45

天。

2.4.3实验步骤

.1造模方法

每日经口灌胃给予受试样品，阴性对照组和模型对照组给予同等容量溶剂。

将动