2.3动物细胞工程及其应用（教学课件）-高中生物苏教版（2019）选择性必修3.pptxVIP

第二章细胞工程第3节动物细胞工程及其应用生物（苏教版）高中生物选择性必修3

1.阐明动物细胞融合技术的概念，举例说出诱导动物细胞融合的方法。2.概述单克隆抗体的制备过程。学习目标1.科学思维：建立模型——动物细胞融合的方法和单克隆抗体制备的基本操作流程。2.社会责任：认同单克隆抗体在临床上具有重要的应用价值。素养要求

植物体细胞杂交植物细胞融合植物组织培养温故而知新植物体细胞杂交技术跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出新的作物类型。

时间成果19世纪30年代观察到肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中有多核细胞1858年观察到正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。1875年第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。1876年在无脊椎动物中发现了细胞合并现象。1962年日本学者冈田发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。1965年英国科学家证实了灭活的病毒可诱发动物细胞融合1974年华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。1975年Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。20世纪80年代发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合)资料：动物细胞融合技术的发展历史

三、动物细胞融合技术1.概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2.结果：形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。3.原理：细胞膜具有一定的流动性4.诱导融合的常用方法：化学方法：如聚乙二醇（PEG）诱导融合法。物理方法：如电场诱导融合法、离心、振动等。生物方法：如灭活病毒诱导法（仙台病毒应用最广泛）。

仙台病毒紫外线灭活丧失感染活性（不感染细胞）保留融合活性（诱导细胞融合）（1）“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。病毒表面的糖蛋白和一些酶与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。（2）灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？

5.过程：动物细胞融合动物细胞培养

7.应用：（1）细胞融合技术已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。（2）利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。6.意义：突破了有性杂交的局限，使远缘（种间、属间、科间、动植物之间）杂交成为可能血型检测试剂

(1)细胞融合体现了细胞质膜的流动性()(2)通过诱导只能使同物种细胞发生融合，而不能使不同物种的细胞之间发生融合()(3)与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导方法有聚乙二醇(PEG)诱导融合法、灭活的病毒诱导融合法()(4)二倍体动物细胞融合后的杂种细胞仍然是二倍体细胞()判断正误√×××

动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较

典题应用1.对比动物细胞融合和植物体细胞杂交技术，下列论述合理的是A.均可使用PEG、电融合或灭活病毒诱导细胞融合B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离C.两者都可以体现细胞的全能性D.在适宜的条件下，均可产生完整个体及时反馈知识落实√2.基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞A.AAaa B.AaBbC.Aabb D.BBbb√

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传统抗体制备方法及缺陷传统抗体缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。不能无限增殖产生大量抗体动物体内抗原反复刺激浆细胞抗体筛选单一B细胞增殖分化抗原不纯抗体不纯

米尔斯坦科勒由于发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖大胆设想：B淋巴细胞骨髓瘤细胞（能产生抗体）（能大量增殖）融合细胞（既能产生抗体，又能大量增殖）

四、动物细胞融合技术的应用——制备单克隆抗体单克隆抗体：指由单个浆细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。小鼠注射特定抗原骨髓瘤细胞的培养多种经过免疫的B淋巴细胞（浆细胞）骨髓瘤细胞融合多种细胞BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）从脾脏中提取

由于培养基中缺乏相应的营养物，骨髓瘤细胞死亡B淋巴细胞培养几天后死亡杂交瘤细胞置于选择培养基（如HAT培养基）上培养BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）第一次筛选

①细胞合成DNA有两条途径，正常细胞内两种途径都有，若全合成途径被阻断，可以通过补救合成途径合成DNA；②骨髓瘤细胞不能合成转化酶和激酶，因此只能进行全合成途径