紫外分光光度法测定蔬菜硝酸盐含量.docVIP

【标题】紫外分光光度法测定蔬菜硝酸盐含量 【作者】王 琳 【关键词】紫外分光光度法??硝酸盐???蔬菜? 【指导老师】叶 林 奇 【专业】生物科学 【正文】1?引言1.1?研究背景、目的和意义蔬菜是人们日常生活中不可缺少的食品，人体内许多营养物质都来自蔬菜，但它又容易富集硝酸盐，特别是叶菜类，极易累积硝酸盐，硝酸盐含量超标已成为影响其品质的重要因素之一。因此控制蔬菜中的硝酸盐含量，减少蔬菜中硝酸盐的累积，大力发展我国无公害蔬菜产业，提高人民生活质量与健康水平，应当加强硝酸盐在蔬菜体内累积的机理研究，同时搞好各种蔬菜体内硝酸盐含量评价。为此，越来越多的人从事有关降低蔬菜硝酸盐含量的研究工作，而如何准确、快速、批量地测定蔬菜中的硝酸盐含量则成为许多分析工作者的研究热点。紫外分光光度法是一种较好的蔬菜硝酸盐含量测定方法。我对重庆市涪陵区12种叶类蔬菜36个样品硝酸盐含量进行了抽样检测与分析，为消费者选用和处理蔬菜提供科学依据。1.2国内外研究现状1.2.1研究方法一般情况下，人体从食物中摄取的硝酸盐占总摄取量的70～80%，其余由水中摄取[1]。而Tremp（1979）认为人体的硝酸盐大部分来自蔬菜，平均占70%，水和饮料占20.9%，肉类制品占6.3%，谷物食品占1.6%，水果占1.0%，奶制品占0.2%，由此看来，蔬菜是人体摄取硝酸盐的主要来源。硝酸盐本身对人体不具有毒害性或毒害性相对较低，潜在危险在于一旦被还原成亚硝酸盐后，就能和人体胃（PH=3）中的含氮化合物（仲胺、叔胺、酰胺及氨基酸）结合成具有致癌性的亚硝胺。尤其当人体中硝酸盐含量很高时，在适合于亚硝胺形成的胃环境中更易形成亚硝胺[2]。因此研究蔬菜硝酸盐有害物质残留在生产、储藏、加工与流通过程中的检测与监控分析方法有哪些呢？蔬菜硝酸盐的测定方法根据检测原理可分为光谱法、色谱法、离子选择电极法、毛细管电泳法等几大类。根据测定的场合可分为实验室测定法和现场测定法，现场测定要求所需仪器简单便携、样品前处理简单或不需前处理,如离子电极法、试纸试粉法、反射仪硝酸根试纸法及最新的可见近红外光谱法。根据对蔬菜的破损情况又可分为破坏性测定法和无损测试法，常规需对蔬菜样品进行粉碎前处理的测定方法属于破坏性测定方法，不需要对样品进行前处理的，如可见近红外光谱法，属于无损测试法[3]。1.2.1.1?光谱法光谱法测定NO3-的原理：利用NO3-在紫外区220nm的特定吸收波长或利用NO3-在可见近红外波段的全波谱特征直接测定，或者利用酚类化合物硝化、水杨酸反硝化、还原剂还原法等生成有色物质，这些有色物质颜色的变化与NO3-的量呈正相关，可在可见光范围测定。这类方法的共同点就是都需要借助于一些光谱仪器如分光光度计、光谱仪等来测定目标物的吸光度或吸收反射光谱。根据测定波长又可划分为可见分光光度法、紫外分光光度法、近红外法及可见近红外光谱法。1.2.1.2.1?可见分光光度法　常用的国标法、酚二磺酸比色法等均属于可见分光光度法。其中，国标法采用的是镉还原剂还原法，把NO3-还原为NO2-，而亚硝酸盐的测定采用Griess法[4]?。经典的酚二磺酸比色法利用酚二磺酸对NO3-进行硝化,生成的硝基酚二磺酸在碱性条件下显稳定的黄色,其测定波长在420nm处[5]?。Wang等探讨了用柱式浓缩分光光度法同时测定水、蔬菜样品中的硝酸盐和亚硝酸盐，此方法可同时测定硝酸盐和亚硝酸盐。Monser等利用流动注射分析方法，在820 nm处分光测定磷钼蓝络合物的吸收光谱来同时测定硝酸盐和亚硝酸盐,测定快速、简单,并且不受pH值限制，硝酸盐和亚硝酸盐的测定范围分别为0.06?～1.6μg/m，l0.05?～1.15μg/ml，测定的极限分别为0.01μg/ml?和0.025μg/ml。Kazemzadeh等利用亚硝酸盐与番红反应形成重盐,重盐引起橘红色的溶液在酸性介质中变成蓝色，在520 nm处有吸收光谱，来测定亚硝酸盐和硝酸盐，测定范围分别是0.0001～3.00μg/ml和0.005～3.40μg/ml,测定的极限分别为0.5 mg/ml和3 mg/ml。Andrade等首先把硝酸盐和亚硝酸盐还原为NO，再在酸性介质中和Fe2-及硫氰酸盐发生反应生成FeSCNNO，?该复合物在460nm处的最大吸收峰与硝酸盐的浓度成正比，然后用流动注射的方法来同时测定蔬菜样品中的亚硝酸盐和硝酸盐，测定范围分别为0.30～3.00 mg/L和1.00～10.00mg/L，测定极限分别为13mg/kg和20mg/kg，每小时可分析样品30～40个，需样量为5.0g，精度和准确度均可达到要求。1.2.1.2.2?紫外分光光度法在弱碱性条件下，用热水从样品中提取硝酸离子（NO3-)，用亚铁氰