紫花鄂北贝母试管快繁技术的研究.ppt

指导老师： 课题负责人： 组员： * 紫花鄂北贝母试管快繁技术的研究 * 目录 * 研究背景 研究现状 目的及意义 技术路线 研究内容 预期成果 研究进度 实验经费 * 采挖不合理，资源严重匮乏 野生贝母多 生长于高海拔地区， 生 长周期长 人工种植难度大， 繁殖系数低，生产时间长 其他原因 药用价值高 供不应求 供不应求 供不应求 供不应求 研究背景 * 紫花鄂 北贝母 抗肿瘤细胞 活性 舒张离体气 管平滑肌 研究背景 鳞片多数、 繁殖系数大 味极苦，生物碱含量高 达0.55% * 镇咳平喘 减慢心率 降血压 抑菌祛痰 未形成商品，是新药用种源 特点 药理研究 贝母组织培养已相继在基因型（种源），外植体，基本培养基，植物生长调节物质，碳源，培养条件，小鳞茎再生，生物碱积累，多倍体诱导等方面做了相关报道，并取得的显著成效。 紫花鄂北贝母组织培养尚未见报道。 研究现状 * 贝母组培技术难关 初代培养污染率高 玻璃化苗和畸形苗 试管苗驯化条件和管理操作严格 移栽成活率低 研究现状 * ①建立贝母的无菌培养体系； ②摸索出贝母的最佳培 养条件； ③快速获得贝母试管苗； ④ 为实现其规模化生产提供技术支撑。 目的及意义 * 诱导愈伤 诱导生芽 诱导生根 试管苗 炼苗 移栽 外植体 贝母植株 技术路线 技术流程图 正交试验 * 研究内容 1、诱导愈伤组织 最佳激素组合及外植体部位的研究（以污染率为指标） 以NAA，6-BA，外植体部位为因素，设置三因素三 水平的正交试验（详见表1）。 表1 不同因素水平表 mg/L 水平 因素 A（6-BA） B(NAA) 外植体部位 1 1.0 0.1 上 2 2.0 0.5 中 3 3.0 1.0 下 * * 研究内容 1.1外植体的消毒 贝母鳞瓣→洗去泥土→中性洗涤剂清洗→蒸馏水清洗→滤纸吸干→75%酒精消毒30s→滤纸吸干→0.1%的升汞消毒15min→无菌水清洗4~5次→滤纸吸干→准备接种。 1.2 接种 将鳞瓣切成约0. 3cm长的切段,接种在附加不同激素组合的MS培养基上培养。每处理接种10瓶，共90瓶；每瓶接种外植体3～4块。培养基中加蔗糖3% ,琼脂 0.75% , PH 5.8～6.0 ,培养室温度25士2℃，光照14h/d,光照强度1500 ～2000 Lux。15～30d后观察统计。 2、诱导生芽（以芽高度、增殖倍数为指标） 以6-BA、NAA、IBA为筛选条件作三因素、五水平的正交实验 ，确定 最佳培养条件 （详见表2）。将得到的愈伤组织块切成1～2cm的小块转 接入不同分化培养基（25个激素组合），15～30天后统计芽的分化情况。 研究内容 * 表2 不同因素水平表 mg/L 水平 因素 A（6-BA） B(NAA) C（IBA） 1 0.5 0.1 0.1 2