[分析化学]实验课件_实验18 硅胶粘合薄层活度的测定.ppt

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* * 1.学会薄层板的制备方法和薄层层析操作。 2.掌握薄层层析的基本原理。 3.学会比移值Rf的测定方法 实验十八 硅胶粘合薄层活度的测定 实验目的 薄层色谱法是一种微量、快速、简易、灵敏的分析方法,其原理为吸附色谱或分配色谱。吸附色谱是利用混合物中各组分被吸附剂吸附能力的不同以及在流动相中溶解度的不同而使之分离。分配色谱则是利用混合物中各组分在固定相和流动相中的分配系数不同而使之分离。其特点是将吸附剂(固定相)均匀地铺在玻璃板上制成薄层,把欲分离的试样点加在薄层上,然后用合适的溶剂展开,通过化合物自身颜色或显色剂显色后,在板上出现一系列斑点,从而达到分离鉴定和定量测定的目的。 实验原理 仪器与试剂 载玻片(7.5×2.5cm)、烧杯(50mL)、毛细管(内径小于1mm)、层析缸。 硅胶H、CMC(羧甲基纤维素钠)(1%),乙酸乙酯∶甲醇∶水=78∶20∶2。罗丹明B的乙醇饱和溶液、孔雀绿的乙醇饱和溶液、苏丹Ⅲ的乙醇饱和溶液(或品红的乙醇饱和溶液)。 本实验以硅胶H为吸附剂,羧甲基纤维素钠(CMC)为粘合剂,制成薄层板,用乙酸乙酯∶甲醇∶水=78∶20∶2的混合溶剂作展开剂。通过实验测出罗丹明B、孔雀绿及苏丹Ⅲ的Rf值,并分析确定混合试样的组成。 将点好样的薄层板样点一端朝下小心地放入层析缸中,并成一定角度(大约倾斜45~60°),同时使展开剂的水平线应在样点以下,盖上顶盖,观察展开剂前沿上升到离板的上端约1cm处取出,并立即用铅笔标出展开剂的前沿位置,晾干。计算各样品的Rf值并确定混合物的组成。 实验步骤

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