细胞培养技术是研究活细胞结构及.pdfVIP

一、 细胞培养 细胞是组织构成的基本单位，细胞培养技术是研究活细胞结构及 生物学功能良好的方法，同时也是研究基因表达调控和分子生物学的 必不可少的研究手段，随着细胞培养技术的成熟和兴起，其在基础医 学和临床医学领域得到广泛的认可和重视，在对细胞形态学、细胞生 物学和细胞遗传学以及病毒学、免疫学、组织学、血液学、肿瘤学等 方面的研究中，细胞培养技术发挥出不可替代的作用。 本实验中心成立至今，细胞培养已开展了多项科研项目，如肿瘤 药物的筛选、骨髓干细胞的培养、抗癌活性肽的抗肿瘤体外研究、细 胞遗传学研究以及与细胞相关的分子生物学研究。目前已常规保存多 种细胞株，如认胃癌细胞，大肠癌细胞、小鼠肝癌细胞以及小鼠白血 病细胞等。 二、 免疫组织化学 免疫组织化学是用标记的抗体或抗原追踪抗原或抗体，经过组织 化学的呈色反应后，用显微镜或电子显微镜观察，在原位上确定组织 后或细胞结构的化学成分或化学性质。凡能作抗原或半抗原的物质， 如蛋白质、多肽、核酸、酶、激素、磷脂、多糖、受体及病原体等都 可用特异性抗体在组织或细胞内用免疫组织化学手段检出或研究，免 疫组织化学特异性强、灵敏度高、定位准确，广泛用于临床诊断、科 研、教学工作。 三、 药物分离与制备 多组分药物，可通过柱色谱方法进行分离、纯化得到单体。我们 可以根据被分离组分的极性来选择流动相与吸附剂，使分离效果最 佳。流动相的洗脱作用实质上是流动相分子与被分离的组分分子竞争 占据吸附剂表面活性吸附中心的过程。强极性的流动相分子占据极性 中心的能力强，而具有强的洗脱作用。非极性的流动相竞争占据吸附 活性中心的能力弱，洗脱作用弱。因此，为了使样品中吸附能力稍有 差异的各组分得到分离，就必须根据样品的性质、吸附剂的活性选择 适当的流动相。 吸附剂和流动相的选择原则：以硅胶或氧化铝为吸附剂的柱色谱 分离极性较强的物质时，一般选用活性较低的吸附剂和极性较强的流 动相，使组分能在适宜的分析时间内被洗脱和分离。如果被分离的物 质的极性较弱，则宜选用活性较高的吸附剂和极性较弱的流动相，使 组分有足够的保留时间。 本实验室拥有日本产YAMAZEN公司的AI—580型单通道中低压色 谱仪（MPLC），可进行各种肽类、糖类等有机化合物的分离纯化。