牛粪发酵沼液对立枯丝核菌的抑制作用.pdfVIP

第29 卷 第3 期 农 业 工 程 学 报 Vol.29 No.3 2013 年 2 月 Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering Feb. 2013 207 牛粪发酵沼液对立枯丝核菌的抑制作用 ※ 李文涛，范金霞，李文哲 ，袁 虎 （东北农业大学工程学院，哈尔滨 150030） 摘 要：为探讨牛粪发酵沼液的抑菌机理，以立枯丝核菌为研究对象，进行了试验研究。采用平皿培养方法：培 养基表面分别均匀涂布1 mL 5 种不同处理的沼液，即不作处理沼液、沼液灭菌、离心上清液、无菌膜滤液和菌体 溶液，中心接种立枯丝核菌并于生化培养箱中28 ℃培养96 h ，每12 h 测量立枯菌落的生长直径以计算抑制率，同 时借助分子生物学手段鉴定了沼液中起抑制作用的微生物。试验结果表明菌体溶液和不作处理沼液对立枯的抑制 效果较好，抑制率最高可达74%和53%，离心上清液的抑制效果次之，无菌膜滤液和沼液灭菌处理的抑制作用较 弱，一般在20% 以下；对沼液中的微生物菌群进行了分离、纯化与筛选，获16 株菌种，并与立枯丝核菌进行对峙 培养试验，其中nfd-9 和nfd-16 具有较强抑制作用，其他菌株几乎没有抑制作用。将nfd-9、nfd-16 与立枯对峙交 界面处进行了扫描电镜观察，结果显示：这2 株微生物通过竞争、拮抗和重寄生等作用来抑制立枯丝核菌的生长， 从而到达防止病害的目的。经分子生物学技术鉴定，确定了nfd-9 和nfd-16 分别为米根霉菌 （Rhizopus oryzae ）和 哈茨木霉 （Trichoderma harzianum）。研究结果为进一步了解沼液抑制真菌的机理提供一定的理论参考。 关键词：抑菌性，植物，疾病控制，牛粪发酵沼液，立枯丝核菌，米根霉，哈茨木霉 doi ：10.3969/j.issn.1002-6819.2013.03.028 中图分类号：S 216.4 文献标志码：A 文章编号：1002-6819(2013)-03-0207-06 李文涛，范金霞，李文哲，等. 牛粪发酵沼液对立枯丝核菌的抑制作用[J]. 农业工程学报，2013，29(3)：207 －212. Li Wentao, Fan Jinxia, Li Wenzhe, et al. Antibacterial mechanism of cow manure biogas slurry on Rhizoctonia solani [J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering (Transactions of the CSAE), 20 13, 29(3): 207 －212. (in Chinese with English abstract) [11] 品品质等方面具有很好的利用价值 。沼液除了有 0 引 言 肥力的特性外，还具有防病抑菌的作用，研究表明 为实现畜禽粪便的无害处理和资源化利用，国 沼液对某些植物病原菌有明显的抑制作用，是理想 家出台了系列政策推进中国新能源沼气产业发展， [12] 的化学农药代替品 。但目前对沼液抑菌的机理尚 预期到2015 年，中国将拥有约8000 处大型沼气工 不