利用PreDictor板高通量筛选CaptoMMC的洗脱条件.pdf

利用PreDictor板高通量筛选CaptoMMC的洗脱条件.pdf

  1. 1、本文档共4页,可阅读全部内容。
  2. 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
GE Healthcare 利用PreDictor板高通量筛选Capto MMC的洗脱条件 Carina Engstrand, Tryggve Bergander and Karol Lacki 瑞典乌普萨拉 通用电气医疗集团生命科学部 简介 表1. 此研究中所测定的因素、相关范围和反应 生物制药行业的需求增加以及时间和费用的限制为早期工 因素 范围 反应 艺开发中的传统层析柱带来了挑战。层析条件的高通量筛 第 一 次 洗 脱 选能大幅度降低此过程所需的时间和样品量。本文描述了 盐浓度 0.25 、 1.00 、 (板)或3 倍柱 1.75 M 体积(柱)的回 PreDictor™板(预装了层析填料的96孔过滤板)在平行筛 收率 选多模式阳离子交换填料Capto™ MMC的洗脱条件上的应 盐类型 NaCl 或 NH Cl 4 用,其中利用了统计学的Design of Experiments (DoE)。并 缓冲液离子强 0.026 、0.163 、 1 将结果与层析柱所产生的数据进行了比较。同时比较了两 度(BIS) 0.300 M 2 5.75 、 6.25 、 种不同形式下开展研究所需的时间和样品。 pH 6.75 实验方法 1 在不同的离子强度下,用Henderson-Hasselbach等式计算而 来,未校正pKa偏移。通过加入氢氧化钠而获得。 在此次洗脱研究中,利用DoE (MODDE™, 8.0版)改变了缓 2 使用的缓冲液为丙二酸钠(pH 5.75和6.25 ),磷酸钠(pH 冲液离子强度(BIS)、pH和两种洗脱盐的浓度,表1列出了 6.75 )。 一系列条件。 材料与方法 从理论上说,PreDictor板的孔中发生的分批吸附/解吸所涉 及到的物质传递原理与柱层析相同 (1) 。为了验证来自 原型PreDictor Capto MMC板的每个孔装入6 μl层析填料,用 PreDictor板的数据与柱层析的数据有着相同的定性信息, 于研究牛血清白蛋白(BSA)的洗脱条件。平衡缓冲液为 在Tricorn™ 5/100柱(柱体积为2 ml)中进行了相关的研 50 mM 乙酸钠,250 mM NaCl ,pH 4.75。利用真空管来去 究。 除板中的液体。 实验设计 对于实验设计,选择了表1中所列的因素和反应。根据 MODDE中的RED-MUP设计来完成PreDictor板的实验设计。 这是一个多水平的全因子设计,以便解析主要、互动和曲 率作用。柱实验设计和评估所使用的软件是MODDE 7.0

文档评论(0)

docindoc + 关注
实名认证
内容提供者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档