o细胞培养条件对狂犬病毒收率的影响.pdfVIP

维普资讯 泰 山 医 学 院 学 报 310 JOURNALOFTAISHAN MEDICALCOLLEGE Vo1．25 No ． 4 2004 改变Vero细胞培养条件对狂犬病毒收率的影响 孙 峰 ，丁 艳 ，郭爱英 ， (1．山东省生物制品研究所，山东 泰安 271000；2．山东米歇尔生物制品有限公司，山东泰安 271000) 摘要：目的 为了获得较大的狂犬病毒收获量。方法 利用 15L培养瓶旋转培养Veto细胞，观察不同培养条 件下，对细胞形态及病毒释放的影响。结果 发现在改变培养条件的情况下，多加入 199培养基，不影响细胞的生 长及狂犬病毒的毒力滴度(U )，而增加了狂犬病毒收获量。结论 此方法可以增加狂犬病毒收率。 关键词 ：狂犬病毒 ；细胞培养；pH；LDs。 中图分类号：R512．99 文献标识码：A 文章编号：1004—7115(2004}04—0310—02 Harvesteffectonrabiesvirusunderdifferentverocellculture conditions SUN Feng，DING Yah。，GUO Ai-y／ng2 (1．ShandongResearchInstituteofBiologicalProducts，Taian271000，China； 2．ShandongMissileBiologicalProductsLtd．，Taian271000，China) Al0straet~Objective：Toobtainmorerabiesvirus．Methods：RotatingVerocellsculturewasdone、th 15Lcuhi— vafionflaskandtheeffectofcellform andvirusdischargewasobservedunderdifferentcultureconditions．Results：Itwas discoverde thatrnoFe199culturemdeiumsdidn’tleadtOgrowthof cellorvirulenceof rabiesvirusbutcouldincreaserabies virus．Condusion：Thismethodcanproducemorerabiesvirus． Keywords：rabies virus；cellculture；pH；UD50 狂犬病是一种疫源性疾病，世界上除一些岛国 010511；昆明种小 白鼠由山东省生物制品研究所动 外，几乎都曾有该病流行 1【】，狂犬疫苗的供需矛盾， 物室提供 ；199细胞培养基购 自上海康达氨基酸厂 由于扩大生产量得 以缓解。随着 2000年版 生《物制 生产。 品规程》】的颁布执行，对原浓缩后狂犬疫苗效力≥ 1．2 方法 2．5IU／n『l，改为精制后≥2．5IU／n『l。精制过程中 1．2．1 细胞培养 采用 15L培养瓶旋转培养，Ve— 造成 1／3的抗原流失，产量相应减少，成本增加。按 ro细胞长成单层后，接种 aG株，经生理盐水洗涤， 现行工艺提高病毒收率 的方法是增加 199的加量， 换成 199维持液，在病毒释放高峰期，收获病毒液。 但 199加液量的增加，病毒相对被稀释，狂犬病毒滴 1．2．2 细胞形态观察 Vero细胞初期呈 圆形、多 度