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(三)显微特征的观察与描述 1. 一般描述方法 (1)组织描述 一般是由外向内依次进行描述。在描述中除要注意其各部分的位置、形态、有无其他组织分布等特征外,还应该注意射线、形成层、栓内层和皮层的特征。 (2)细胞形状的描述常采用平面和立体2种方式进行,可根据具体情况选择运用其一进行描述。平面描述,就是根据显微制片上见到的细胞形状进行描述;立体描述,就是把显微制片上见到的细胞3个切面(横切、径向纵切、切向纵切)的形状综合起来,描述其立体形状。 (3)大小和数量的描述 ① 当目的物的大小或数量差异很小时,可记载1个数字,如直径约30μm。 ② 当目的物的大小或数量差距不很大时,可记载2个数字,即最小值与最大值,如长为15~40μm;如有少数达50μm,则可记其长为15~40(50) μm。 ③如目的物的大小或数量有很大差距时,可记载3个数字,即最小值、常见值(不是平均值)和最大值,如长20~40~80μm。 (4)颜色的描述 描述的方法与性状鉴定中药材的颜色描述方法相同。 2. 粉末显微特征的描述 在进行粉末性中药的显微特征描述时,首先需决定描述这些显微特征的顺序,一般可遵循 “先多数后少数,先特殊后一般,先感观后测试”的原则。 (四)电子显微镜鉴定技术 四、理化鉴定法 理化鉴定法是利用物理的、化学的或仪器分析方法,鉴定中药的真实性、纯度和品质优劣程度的一种鉴定方法。 1.物理常数测定法 包括相对密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、凝固点、熔点等的测定。这对挥发油、油脂类、树脂类、液体类药(如蜂蜜等)和加工品类(如阿胶等)药材的真实性和纯度的鉴定,具有特别重要的意义。 2. 微量升华 微量升华是利用中药中所含的某些化学成分,在一定温度下能够升华的性质,在显微镜下观察其升华物的形状、颜色或加某种化学试剂观察其化学反应作为鉴别的特征。必要时可用显微熔点测定器测定升华结晶物的熔点。如大黄的升华物为棱状针晶或羽状结晶。 3. 电泳分析法 电泳(electrophoresis, EP)是一种分离和鉴定混合物中带电离子的技术,其原理是利用中药含有蛋白质等带电荷的成分,在同一电场作用下,由于各组分所带电荷的性质、电荷数目以及分子质量不同,而泳动方向和速度不同,在一定时间内,各成分的泳动率不同,结合谱带数和染色不同达到鉴定的目的。 4. 化学定性分析 化学定性分析是指利用某些化学试剂能与中药中的某种或某类化学成分产生特殊的气味、颜色、沉淀或结晶等反应,来作为鉴别真伪的手段。如含生物碱类、有机酸、黄酮类、蒽醌类等成分的鉴别分析。 5. 化学定量分析 化学定量分析是通过对中药含有的某种有效成分、有效部位、杂质或有害物质的含量测定,来控制中药质量的一种方法。中药化学定量分析通常包括重量分析法和容量分析法两大类。 (1)重量分析法 (2)容量分析法 6. 分光光度法 分光光度法(spectrophotometry)又称“光谱鉴定法”,它是通过测定中药中被测物质在某些特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。 (1)紫外光谱法 (2)可见分光光度法 (3)红外光谱法 主要用于中药的定性鉴别和所含化合物的结构分析。 (4)原子吸收光谱法 (5)荧光光谱法 7. 色谱鉴定法 色谱鉴定法根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。 (1)薄层色谱法 (2)薄层扫描法 系指用一定波长的光,可用于中药的有效成分和杂质的含量测定。 (3)毛细管相鉴定法 毛细管相鉴定法是利用中药中所含的化学成分,经纸片毛细管作初步分离后,再与试剂显色进行鉴定的一种方法。常用于中药中有机酸、氨基酸、酚类和苷类成分的鉴别,常用的方法有毛细管吸附法和毛细管展层法 (4)气相色谱法 气相色谱法主要用于含挥分性成分的中药鉴定。 (5)高效液相色谱法 高效液相色谱(HPLC)的原理与一般液相色谱十分相类似,流动相均为液体,包括有液-固色谱、凝胶色谱、离子交换色谱和液-液色谱。本法可适用于中药中各类成分的鉴定。 8. 质谱鉴定法 等 五、生物鉴定法 生物鉴定(bioassay)法又称“生物测定法”,主要是利用中药或其所含的化合物对生物体(organism)作用强度的大小,以及用DNA特异性遗传标记特征和基因表达差异等来鉴别中药的品种和质量的一种方法。通常分为生物效应鉴定法和基因鉴定法两大类。 (一)免疫鉴定法
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