免疫血清, 巨噬细胞及补体对体外培育旋毛虫肌幼虫的杀伤作用.pdfVIP

第 卷 第 期 ， 10 1 寄生虫与医学昆虫学报 VOI . 10 NO . 1 年 月 ， 2003 3 Acta ParasitOI . Med . EntOmOI . Sin . Mar . 2003 免疫血清、巨噬细胞及补体对体外培养 旋毛虫肌幼虫的杀伤作用! 王少华 诸欣平!! 杨雅平 杨 静 姜洪杰 （首都医科大学基础医学院寄生虫教研室，北京 100054 ） 摘要 为进一步了解旋毛虫成虫抗原免疫血清在体外对旋毛虫肌幼虫的杀伤情况，采用体外培养方法进行 了免疫血清、免疫血清与巨噬细胞、免疫血清与巨噬细胞及补体对旋毛虫肌幼虫的杀伤试验。结果显示： 单纯免疫血清对体外培养的旋毛虫肌幼虫无明显杀伤作用，而免疫血清与巨噬细胞或免疫血清与巨噬细胞 及补体联合对体外培养的旋毛虫肌幼虫均有杀伤作用，以免疫血清联合巨噬细胞及补体的作用最显著。 关键词 旋毛虫肌幼虫 免疫血清 巨噬细胞 补体 体外杀伤 人生食或半生食含有旋毛虫幼虫囊包的猪、羊、牛等肉类可感染旋毛虫，其幼虫寄生 于宿主横纹肌内，产生严重损害。现已知道宿主感染旋毛虫后免疫系统产生一系列的免疫 应答，包括体液免疫及细胞免疫 （张国华等，1998 ）。有关免疫血清、巨噬细胞及补体对 肌幼虫的体外杀伤作用目前尚未见报道。本研究分组进行旋毛虫成虫抗原免疫血清对体外 培养旋毛虫肌幼虫的杀伤试验，通过观察虫体活动力以了解其攻击杀伤能力，并探讨了可 能的杀伤作用机制及相关因素。 ! 材料和方法 ! ! 旋毛虫肌幼虫的制备 采用断颈椎法，将感染黑龙江猪源旋毛虫 （本室保种）的小鼠 （购自首都医科大学实 验动物中心）处死后，去皮及内脏，剪碎肌肉，用组织匀浆器进一步打碎，配成 胃蛋 4 % 白酶 （活性比 ）、 盐酸溶液，放入 水箱消化 。反复用生理盐水洗涤、沉 1I 3 000 1% 37 C 41 淀，收集纯净肌幼虫，镜下观察活力并计数 （ ， ）。将洗涤纯净的肌幼虫 GOyaI ! #$ . 1993 分别放入预温含2mL 10 % 小牛血清及双抗 （青霉素、链霉素）的RPMI-1640 培养液的培养 瓶中，每瓶约 条。将这些培养瓶放到 ， 培养箱中培养 天后进行杀伤试 2 000 37 C 5 % CO 1 2 验 （张国华等，1998）。 !# 小鼠腹腔巨噬细胞悬液的制备 取体重20g ~ 25g 的小白鼠 （雌性BALB/ c 纯系小鼠），每只注射 1mL 2 % 无菌淀粉液， 后，将小鼠断颈椎处死，仰卧固定到手术板上， 酒精消毒腹部，从髂窝处剪开皮 481 75 % 收稿日期：2002 - 11 - 02，加急 美国中华医学会 （ ）（ ）、北京市教委科技发展基金 （ ）、北京市跨世纪优秀人才 ! CMB ParasitOIOgy 98-674 2001-2004 工程 （ ）资助项目 2001-2003