【医学实验】禽流感病毒的鸡胚培养法课件.pptVIP

实验二 流感病毒的收获及血凝效价测定 第一部分 流感病毒的收获 实验目的 掌握从鸡胚尿囊腔收获流感病毒的方法，获得大量的病毒抗原。 实验原理 将流感病毒接 种于鸡胚尿囊腔后， 病毒就在尿囊的内 胚层细胞繁殖，繁 殖1~2天后，病毒颗 粒释放至尿囊液中， 从而使尿囊腔中含 有大量病毒，通过收获尿囊液， 可以得到较大量的流感病毒。 实验材料及器械 1. 已接种流感病毒的十日龄鸡胚 2. 无菌镊子、眼科剪刀、玻璃吸管、无菌EP管（1.5和10mL各一个） 3. 75％酒精棉球 实验方法与步骤 收获时间根据不同的病毒而异，流感病毒一般培养36～48小时即可进行收获。收获前一天晚上，将鸡胚于4℃冰箱过夜（如果急于收获亦可于－20℃放置1小时左右），将鸡胚冻死，使红血球凝固，这样可避免在收获时流出的血细胞，同尿液或羊水里的病毒发生凝集，造成病毒滴度的下降。 4 ℃冷藏时间不宜过长，过长易造成散黄，影响收获。快速冷冻时间也不易过长，一旦鸡胚冻成冰块就无法收获。 2. 经过冰冻的鸡胚用碘酒、75％酒精消毒鸡胚气室部卵壳 3. 用无菌镊子将消毒过的壳打碎，轻轻揭去气室部位