Ad-IL-24对SGC-7901胃癌细胞生长抑制的体外实验.pdfVIP

生 物 工程 学报 ChinJBiotech2009，October25；25(1O)：1586-1592 journals．im．ao．cn ChineseJournalofBiotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im．ac。on @ 2009InstituteofMicrobiology,CASCSM,Allrightsreserved Ad观 ．2 对SGC．7901胃癌细胞生长抑制的体外实验 包婉蓉，缪竟诚，盛伟华，单云波，李正神，汪小华，井莹莹，韩亚丽，杨吉成 苏州大学医学部基础医学与生命科学学院 细胞与分子生物学教研室，苏州 215123 摘 要：旨在研究携带人 儿一24基因的腺病毒表达载体(Ad．／L一24)对 SGC一7901人 胃癌细胞的生长抑制作用并分析其分 子机制 以不同MOI(感染复数)的Ad空载体腺病毒感染SGC一7901人 胃癌细胞，筛选出最佳感染剂量：Ad一／L．24以最佳 感染剂量感染SGC一7901胃癌细胞，RT-PCR法和 Westernblotting法检测腺病毒介导的儿．2基 因在SGC一7901胃癌细胞 中的转录；MTT法检测Ad．1L一24对 SGC一7901胃癌细胞的生长抑制作用，流式细胞仪检测其诱导SGC．7901人 胃癌细胞 凋亡和细胞周期改变的效应，Hoechst33258染色荧光显微镜检测其诱导 胃癌细胞凋亡的核形态改变；RT-PCR半定量法 进一步检测SGC．7901胃癌细胞 中凋亡相关基 因的转录 结果显示，100MOI为感染SGC一7901胃癌细胞的腺病毒最佳 感染剂量；Ad．／L一24能成功介导儿一 基 因在SGC一7901胃癌细胞中转录性表达；Ad一儿一 感染SGC．7901胃癌细胞后，能 明显抑制胃癌细胞生长和诱导凋亡；Ad．儿．2能显著上调SGC一7901胃癌细胞中bax．caspase一3和p53的表达和下调bc1．2 的表达。因此，腺病毒介导的儿． 表达具有明显抑制 SGC一7901人胃癌细胞生长和诱导凋亡的抗肿瘤效应，其机制可 能与上调 bax／bcl一2．caspase．3和p53密切相关。 关键词：腺病毒，人 白介素一24，胃癌，肿瘤基因治疗，抗肿瘤效应 AdenovirusmediatedIL一24geneexpressionsuppressesgastric - - J 一 ● ‘ CanCercell2r0WtnZ vttro W anrongBao，JingchengM iao，W eihuaSheng，YunboShan，ZhengyiLi，XiaohuaW ang，Yingying Jing，YaliHart，andJichengYang DepartmentofCelluarandMolecularBiology，MedicalSchool，SoochowUniversity，Suzhou215123，China Abstract：Tostudytheinhibitoryeffectofarceombinantadenoviralvectorcarryinghumna ／L．2 geneonSGC一7901humangastric cnacercel1．W_einfectedhteSGC一7901gastriccnacercellswithAdblankadenovirusatvariousmultiplicityofinfection(MOIs)to fmdhteoptim~ infectivedose．TheSGC一7901tumorcellswereinfected wiht Ad-／L一2 athteoptima】M OIin thefollowing experiments． Adenovirus—mediated ／L一2 trna scription expression in SGC．7901cells was examinde bv RT_PCR The