融合蛋白GGH在小鼠体内的药效学评价.pdfVIP

· 1210 · 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2011Sep；27(9)：1210—4 网络 出版时间：2011—8—159：02 网络 出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1086．R09O2．021109．1210_1307．htrnl 融合蛋白GGH在小鼠体内的药效学评价 范 翰，李现丽，窦文芳，杜 斌，邱丽颖，金 坚，许正宏 (江南大学医药学院，江苏 无锡 214122) doi：10．3969／j．issn．1001—1978．2011．09．007 GLP-1因能促胰岛素释放和促胰岛细胞增殖而成为 文献标识码：A 文章编号：1001—1978(2011)09—1210—05 该领域的研究热点。但是 GLP-1在体内的半衰期 中国 图 书分 类 号：R一332；R322．57；R329．24；R587．1； 极短，目前研究主要集中在 以GLP．1为基础的分子 R977．15：R977．6 衍生物 -2上，现已有部分长效药物被批准用于临 摘要：目的 探讨融合蛋白(GLP-1位。)：-HSA(GGH)对实验 床 J。该研究前期利用分子生物学手段，将 GLP一 性B细胞轻度损伤的小鼠空腹血糖 (fastingbloodglucose， 1突变体 GLP一1。两分子串联后和人血清 白蛋 白 FBG)和胰岛功能的影响。方法 对小鼠进行造模 ，血糖仪 (HSA)融合构建长效融合蛋白GGHL5]，并对其进行 测定FBG，胰腺组织切片行 HE染色，建立 B细胞轻度损伤 模型小鼠。实验分为正常对照组(normalcontrolgroup，NC)、 分离纯化 。后期筛选和建立了一种31细胞轻度 模型对照组(modelgroup，DM)、GLP-1对照组、HSA对照组、 损伤模型，用于 GGH及近年来新兴的促 B细胞增 Exendin-4(Ex-4)阳性对照组、GGH低 (2mg·kg )、中(6 生类融合蛋白药物疗效的快速筛选、评价及作用机 mg·kg )、高(18mg·kg )剂量组(GGH2、GGH6、GGH 制的初步探讨。 l8)治疗。记录 14d内的饮食、饮水、尿量、体重及 FBG变 1 材料与方法 化 ，放射免疫分析法测定空腹血清胰岛素水平(fastingserum 1．1 试剂和仪器 STZ，Sigma公司；GLP1单体，上 insulin，FINS)，免疫组化方法观察胰岛B细胞增殖。结果 海强耀生物工程公司；HSA，湖南紫光古汉南越制药 C57BL／66小鼠单剂量腹腔注射 STZ120mg·kg 14d后 有限公司；Ex-4，Sigma公司；融合蛋白GGH，江南大 可成功制备稳定敏感的B细胞轻度损伤模型；治疗 14d， 学制药工程实验室 (HPLC检测纯度 95％)；碘 GGH中、高剂量组与DM组、GLP-1组、HSA组 比较饮食、饮 [ I]胰岛素放射免疫分析药盒，北京市福瑞生物工 水、尿量减少(P均0．05)，FBG降低 (P均 0．01)，FINS 升高(P均0．05)，胰岛细胞增殖增加 (P均 0．05)，GGH 程公司；小鼠增殖细胞核抗原 (PCNA)抗体，链霉亲 高剂量组的FBG、FINS与 NC组、Ex4组 比较差异均无显著 和素一过氧化物酶 (SABC)及DAB显色试剂盒，武 性(P均 0．05)，胰岛细胞增殖与Ex-4组比较差异无显著 汉博士德生物工程有限公司。Freestyle血糖仪及检 性(P0．05)。结论 融合蛋白GGH通过促进 B细胞的增 测试纸条，