大鼠心肌缺血后处理模型的改良及评价.pdfVIP

医学临床研究 2008年 12月 第 25卷 第 12期 JClinRes．Dec．2008，Vol25，NQ12 心肌缺血 ／再灌注损伤 (myocardialischemia／ min后 A组松开压管实施再灌注 120min，造成MI／R reperfusioninjury，MI／R)是 医学研 究 中的热 点。 模型，C组则经过3次 15S的松管一压管后再开放 120 2003年 Zhao等 提出了心肌缺血后处理的方法降 min，造成缺血后处理模型。③所有大 鼠再灌注开始 低 MI／R，即经过一段时间的缺血后，再灌注 即刻进 后才关 闭胸腔 ，持续机械通气至再灌注结束。改 良 行多次短时间的缺血一再灌注，激活内源性的保护机 组：①保留自主呼吸，不进行气管切开。开胸时助手 制。缺血后处理的实验研究引起了广泛关注。在体 用面罩(用洗耳球 自制)扣紧鼠面部，连接呼吸机至大 动物实验中通过手术方法阻断与开放冠脉，是制造 鼠胸廓随呼吸机起伏 良好，呼吸频率 70～8O次／分 MI／R模型与心肌缺血后处理模型的常用方法 。大 钟。②开胸时不断肋骨 ，使用纹式钳撑开肋间破心包 鼠冠状动脉侧支循环少 、重复性好、价格低廉，是研 后，左手食指和大拇指挤压右胸和腹部，迅速弹出心 究 MI／R的经典实验动物_l2]。传统方法制模成功率 脏，在胸腔外对 LAD套线。结扎时于 prolene线与 高 ，但是操作时间长 ，效率低 ，且术后大 鼠长期生存 LAD之间放一硬膜外导管做垫管，套线两端则穿过 率不高。本研究对传统方法进行一些改进 ，并从多 一 段硬压管 (图一1)。下压导管致心前区变紫后用小 个方面予以评价，现报道如下。 血管夹夹住压管尾端，迅速将心脏放回胸腔，轻挤胸 腔排气，于吸气末提拉荷包线关胸。作为垫管的硬膜 1 材料 与方法 外导管的一端置于胸腔内，另一端于胸腔外接注射 1．1 动物选择 清洁级 SpragueDawley(SD)大 器，抽取胸腔 内气体。③结扎过程在 1～2min内完 鼠8O只，雄性 ，月龄 12±1周，体重 250～300g，术 成 ，待 自主呼吸稳定则除去面罩。④缺血 30min后 ， 前标准 Ⅱ导联心电图无异常，由中南大学湘雅二医 松掉小血管夹，B组从胸外轻轻往外拔压管，使冠脉 院实验动物中心提供 。用前适应性喂养 1周。 再通；D组再通 15S后又提紧套线两端向下压管 15S 1．2 动物分组 8O只大鼠随机分为传统心肌缺 造成缺血 ，反复 3次后再灌 120min，造成缺血后处理 血 ／再灌注组，改 良心肌缺血 ／再灌注组 ，传统心肌缺 模型。 血后处理组，改 良心肌缺血后处理组 ，每组各 2O例。 1．3 药物与试剂 戊 巴比妥钠、Evansblue，TTC 染色剂 (Sigma公司)。心肌酶学试剂盒(上海长征一 康仁医学科学有限公司)。 1．4 仪器 BI一420生物机能实验系统 (成都泰盟 科技有限公司)；HX一300动物呼吸机 (成都泰盟科 技有限公司)；Olympus体视显微镜 ，电子天平等。 图1 改良式 IAD结扎法 1．5 模型制作方法 A、B、C、D各组均进行以下步 骤：①大 鼠称重，3 戊 巴比妥钠 5Omg／kg腹腔注射， 1．6 观察指标 ①观察各组的造模成功率、从麻醉 麻醉后仰卧位固定在鼠板上。常规消毒、铺 巾。②监 到关胸需用时间、呼吸机通气时间。②连续记录心 测标准Ⅱ导联心电图。右颈总动脉插管，连续监测动 率 (HR)、平均动脉压 (MAP)，动态描记心 电图，观 脉血压。③胸骨左缘 0．5cm处做一与胸骨平行的纵