华南虎源血巴尔通体的PCR检测.pdfVIP

野生动物 ChineseJournalofWildlife 2010，31(6)：301—304 华南虎源血 巴尔通体的PCR检测 陈 武 苏 力 彭仕明 (广州动物园，广州，510070) 摘要：为了快速准确检测华南虎感染的血 巴尔通体种类，我们根据 已发表的猫血 巴尔通体的 16SrRNA基因序列， 利用软件 PrimerPremier5．0设计 2对特异性引物，以华南虎源血巴尔通体基 因组 DNA进行 PCR检测。2对引物分 别扩增出1452bp和170bp的rDNA序列 ，1452bp序列与 GenBank 发表的 3种猫血 巴尔通体序列相似性分 别为 99．3％、91．7％和 79．5％，而170bp序列与序列AM748929的相似性为 100％。实验结果表明华南虎感染的血巴尔通 体为大型猫血巴尔通体，实验建立的PCR检测方法为华南虎血巴尔通体病的诊断及分子流行病学的调查提供了新的 手段。 关键词 ：华南虎 ；血巴尔通体 ：PCR 中图分类号 ：$85 文献标识码 ：A 文章编号：1000—0127 (2010)06—301—40 PCR Amplification ofHaemobartonellaofSouth ChinaTigers ChenWu Suli PengShiming (GuangzhouZoo，Guangzhou，510070，China) Abstract：HaemobartonellainfectingSouthChinatigers (Pantheratigrisamoyenssi)wasdetectedbyPCRamplificationof2 pairsofprimers，designedaccordingtOthepublishedbasesequenceof16SrRNAgeneofHaemobartonellafelisofthedomestic eatusingsoftwarePrimerPremier5．0，wereamplified and2 fragments，1452 and 170 respectivelywereobtained and se— quenced．Thesequenceof1452bpwerecomparedtohomologoussequencesofCandidatusmycoplasmaHaemofelis，Candidatus mycoplasmaHaemominutum andCandidatusmycoplsma turicensiinGenBank andthehomologyof sequenceswere99．3％ ． 91．7％ and79．5％ respectively．Thesequenceof170bpfragmentwascomparedtoAM748929andthehomoloyg was100％ ． ResultsrevealedthatHaemobartonellainfectingthetigerwasamemberofCandidatusmycoplasmaHaemofelisandtheseprim— elscouldbeusedtoPCR detectionanddiagnosisofHaemobartonellaofSouthChinatigers． Keywords：SouthChinatiger；Haemobartonella；PCR amplification 附红细胞体病 (Eperythrozoonosis)是由附红细胞体 清学检测、PCR技术等，但前二者 由于受到多种因素的 (Eperythrozoon)寄生于人和动物红细胞表面、血浆和 影响，极容易得到假 阳性或假阴性的结果，导致兽医临 骨髓而引起的一种人兽共患传染病，临床上以发热、贫 床上的误诊 。同时，形态学检测方法