黄疸患儿尿中人巨细胞病毒检测.pdfVIP

2010年第 14卷第 19期 实 用 临 床 医 药 杂 志 JournalofC1inicalMedicineinPractice ·143 · 黄疸患儿尿 中人 巨细胞病毒检测 林 颖 ，季修庆，张菁菁 ，成 建，胡 平，马定远 ，许争峰 (江苏省南京市妇幼保健院遗传室，江苏 南京，210004) 关键词g黄疸 ；新生儿；人巨细胞病毒；荧光定量PCR；尿液 中图分类号：R722 文献标识码 ：A 文章编号：1672—2353(201O)19-0143-01 人巨细胞病毒 (H ，)感染可造成新生儿 2 结 果 的多器官、多系统受累。据文献报告 ，活产新生儿 感染 HCMV 占1％～2％ 【。黄疸是 HCMV感 2．1 黄疸患儿与对照组患儿尿液 中HCMV检测 染累及消化系统的最常见临床表现。研究表 明， 结果 HCMV可侵犯肝细胞和肝 内外胆管系统，是引 1096例黄疸患儿 中，HCMV—DNA定量检 起新生儿黄疸的重要病原l2l，因此检测黄疸患儿 测阳性 247例，阳性率为 22．54％。500例对照 的HCMV，对于明确临床诊断和治疗都具有重要 组患儿尿液中HCMV—DNA定量检测阳性 2例， 意义。本研究采用荧光定量PcR(FQ—PcR)方法 阳性率为 0．40％。两组患儿阳性率 比较差异具 检测 1096例黄疸患儿和 500例对照组患儿尿液 有统计学意义(P0．01)(表 1)。 HCMV-DNA，以期了解黄疸患儿HCMV 的感染 表 I 黄疸患儿与对照组患儿尿液中HCMV检测结果 情况。 1 材料与方法 对本院 2005年 1月--2009年 9月 以黄疸就 两组 比较 ，P001。 诊的 1096例患儿 (男 568例，女 538例)，年龄 2．2 黄疸患儿中早产儿和足月儿HCMV检测 20～120d。500例对照组患儿为在我院无黄疸 结果 症状的患儿。分别取其晨尿 3～5mL置于无菌 1096例黄疸患儿中，足月儿 994例，HCMV- 试管 中。 DNA定量检测阳性 205例，阳性率为 20．62％。 DNA模板的提取：在充分混匀后取 1n 晨 早产儿 102例，HCMV-DNA定量检测阳性 42 尿，12000r／min离心5min，弃上清，沉淀中加 例，阳性率为 41．18％。两组间差异具有统计学 入 50 IDNA提取液，混匀，经 100℃恒温处理 意义 (P0．01)(表 2)。 10min，然后离心 12000r／min5min，取上清待 表 2 黄疸患儿 中早产儿与足月儿 HCMV-DNA检测结果 检。 FQ—PCR：按试剂盒 (中山医科大学达安基 因 诊断中心)说明书操作，PCR反应管中加 2 L DNA模板提取液、PCR反应液等共 45 L反应体 系。用 已知 HCMV—DNA含量的标准阳性对照 两组比较，P0．01。 品，制备标准曲线 ，同时设置阳性和阴性对照， 3 讨 论 置于FQ—PCR扩增仪 中(ABI7500型)。扩增条 件 ：① 93℃预变性 2min；② 93℃ 45s一55℃ HCMV是一种广泛存在的疱疹病毒，正常人 60S，共 10个循环 ；③ 93℃ 30s一55℃45S，共 感染多为潜伏性感染，新生儿主要是通过胎盘、产 30个循环。