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第 2O卷第 4期 激 光 生 物 学 报 Vo1．20No．4
2011年 8月 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Aug．2011
doi：10．3969／j．issn．1007-7146．2011．04．025
甜叶菊 RAPD反应体系的优化
胡能兵 ，何克勤 ，张子学 ，林 平 ，隋益虎，崔广荣
(1．安徽科技学院植物科学学院，安徽 凤阳233100；2．安徽省甜叶菊工程技术研究中心，安徽 蚌埠233000)
摘 要：以甜叶菊为试材，对影响其RAPD反应体系的7个因子进行优化。结果表明，20 L的优化体系包括：
双蒸水 13．6 L，10×Buffer(含 15mmol／LMgC12)溶液 3；rL，2．5mmol／L的dNTPS1．2IxL，10txmol／L的引物
1txL，20ng的模板DNA1 L，1UTaq聚合酶；热循环程序为：94oC预变性4min，94℃变性30S，35℃退火
30S，72oC延伸 1min，40个循环，最后72℃延伸7min。
关键词 ：甜叶菊；RAPD；优化
中图分类号 ：Q943
文献标识码 ：A
文章编号：1007-7146(2011)04-0560-04
Optimization oFRAPD ReactionSystem inSteviarebaudianaBertoni
HU Ⅳe 6 ，HE Keqin，ZHANGZixue，LIN P ，SUIYihu，CUIGuangrong
(1．CollegeofPlantScience，AnhuiScienceandTechnologyUniversity，Fengyang233100，Anhui，China；
2．AnhuiProvinceResearchandTechnologyCenterofSteviarebaudianaBertoni，Bengbu233000，Anhui，China)
Abstract：Optimizationof7factorsofRAPDreactionsystem inSteviarebaudianaBe~oniwasstudied．Theresultsin—
dicatedthat，optimizationsystem of20 x／Lincluded：13．6}xLofddH20，3tLLof10xBufferwith 15mmol／LMgC12，
1．2 Lof2．5mmol／LdNTPS，1 Lof10}xmol／LPrimer，1 L0f20ngDNA and 1unitofTaqpolymerase；thermal
cycleprogram was：1cycleofdenaturingfor4minat94℃ ，40cyclesofdenaturingofr30Sat94oC，annealingofr30 S
at35℃ ，primerextensionofr1minat72oC，andthelastcycleofextensionofr7minat72℃ ．
Keywords：SteviarebaudianaBertoni；RAPD；optimization
甜叶菊 (SteviarebaudianaBertoni)简称甜菊、甜 蔗、甜菜之后 的世界第三大糖源。甜叶菊具有一定
草、甜茶 、密菊等，为菊科甜叶菊属多年生草本植物， 的药理作用，对糖尿病、心脏病和高血压等有较好的
原产南美巴拉圭一带，中国于 1976年引种成功¨。 疗效 ，现已广泛应用于保键饮料、低热量食品和医药
甜叶菊富含糖苷类物质，其糖苷具有高甜度(为蔗糖 行业中 。
250～450倍)、低热量 (仅为蔗糖的)／300)的特点， 目前，甜叶菊在国内外的研究仍然处于起步阶
在体内不参与代谢 、不蓄积、无毒性，被誉为是继甘 段，如栽培、离体快繁 、糖苷鉴定及优 良
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