出口贝类中原多甲藻酸贝类毒素检验 高效液相色谱串联质谱法 编制说明.docVIP

进出口贝类中原多甲藻酸类贝类毒素的测定 高效液相色谱串联质谱法 标准草案编制说明 辽宁出入境检验检疫局 2012年8月 《进出口贝类中原多甲藻酸类贝类毒素的测定 高效液相色谱串联质谱法》 编制说明 一、任务来源 本标准的制订是“十五”国家重大科技专项 贝类毒素检测新技术研究(2001BA804A20-2)的后继研究成果及课题输出标准，由辽宁出入境检验检疫局负责研究并起草完成。 二、原多甲藻酸(azaspiracidsAZAs)贝类毒素是由原多甲藻(Properidininm crassipes)产生40个碳原子组成，分子中有20个立体异构中心和9个环，具有独特的6,5,6-三螺环和环胺结构图1。人食用含有的贝类后会出现恶心呕吐腹泻胃痉挛等症状与腹泻性贝毒素DSP)中毒症状非常相似而AZA的作用时间更久中毒后的恢复期更长是一类比DSP危害更大的毒素2004年由联合国粮农组织、世界卫生组织和政府间海洋委员会共同组建的双壳软体生物毒素工作组将AZA毒素归为8大类贝类毒素之一AZAs遍及贝类全部组织。在染毒初期AZAs集中分布于贝类消化腺中，后期则转移到其它组织(如肌肉)中，毒性可在贝体内持续存留8个月之久，自然净化速率非常慢。不同成分分布于贝类的不同组织中，AZA1主要分布于消化腺，而AZA3则主要分布于消化腺以外的其它组织。不同成分的毒性差异很大，AZA2和AZA3均比AZA1毒性强，AZA1、AZA2和AZA3对小白鼠的最小致死剂量分别为0.2×10-6 、0.11×10-6 和0.14×10-6。2002年3月，欧洲委员会规定双壳类 (全体或任何可食部分)AZAs的最大允许浓度为160 μg/kg(以贝肉计)世界贸易的频繁交流有毒原多甲藻随船舶压舱水进入我国的可能性大大增加具有污染我国贝类产品的潜在威胁。 在我国的某些海域已发现有多种原多甲藻的分布AZAs）的国家标准及行业标准，相关的技术储备不足[1]。而欧盟、美国等国家在2009年始，就要求辽宁獐子岛等大型贝类出口企业进行原多甲藻酸类贝类毒素的监控及检测，基于以上原因,本研究最终制定原多甲藻酸类贝类毒素（AZAs）液相色谱-串联质谱联用检测方法。 本标准针对AZA中毒性最强、分布范围最广主要成分的AZA1,AZA2和AZA3， 采用液相色谱-串联质谱联用( HPLC-MS/MS) 技术，建立了贝类中AZAs的检测标准方法，并用于实际贝类产品的分析。本标准的制订是“十五”国家重大科技专项 贝类毒素检测新技术研究(2001BA804A20-2)的后继研究成果及课题输出标准。此课题鉴定结题后，课题组成员在课题一系列贝类毒素检测新技术研究成果的基础上，研究制定了新型贝类毒素——原多甲藻酸贝类毒素（AZAs）的高效液相色谱串联质谱检测标准。该方法已制定为辽宁出入境检验检疫局技术中心非标准方法发布实施，在检验检疫工作中推广应用，已检测贝类产品近两千批次，在渤海黄海海域进行原多甲藻酸贝类毒素监控工作。 本标准制定对于填补我国在原多甲藻酸贝类毒素检测领域空白，进一步增强我国海洋贝类产品毒素监测和检测水平，打破国外对于贝类产品国际贸易的技术壁垒，促进我国贝类产品的对外出口具有重要的价值；为贝类产品的品质控制和提高质量提供可靠的保证，可以为政府部门制订相应标准提供科学依据，促进有关部门将原多甲藻酸贝类毒素检测尽快纳入预防性安全监控标准体系。 三、编制依据 本标准是按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》和GB/T2000.1.4-2001《标准编写规则 第4部分：化学分析方法》的要求编写的。 本标准方法中回收率实验的添加浓度水平是根据“关于印发《进出口食品安全风险监控实验室质量控制指南》的通知（质检食函[2011]398号）”的有关规定要求进行设计实施的。 四、标准化过程 本标准起草人通过查阅相关资料和文献，结合本实验室的条件和原有工作基础，以及本研究的技术特点，通过大量的室内回收率、精密度及应用范围等一系列实验研究，建立了一个高选择性、高灵敏度测定贝类中原多甲藻酸类贝类毒素的检测方法。本标准经五家实验室验证，方法的回收率、精密度均符合SN/T 0005-1996《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定扇贝海产双壳类软体动物见于潮间带到深海。牡蛎一类海产固着生活型的双壳贝类，一般固着生活于适宜海区的岩石上。大多栖息在风浪较小的内湾、且有适量淡水注的中、低潮区潮间带沙泥滩涂中（含沙率在70%～80%为宜），但盐度较高的沿海岛屿和数米深的潮下带，也偶有发现脂溶性聚醚化合物，具有独特的6,5,6-三螺环和环胺结构，是一类含有螺环的含氮聚醚，末端含有羧基。填料是乙烯吡咯烷酮-季胺基共聚物属于阴离子交换及反相非极性混合填料。含有螺环的