NY_T 800-2004 生鲜牛乳中体细胞测定方法.doc

生鲜牛乳中体细胞测定方法 Enumeration of somatic cells in raw milk (ISO 13366—1：1997，Millk—Enumeration of somatic cells—Part 1：Microscopic method,ISO 13366—2：1997，Millk—Enumeration of somatic cells—Part 2： Electronic particle counter method，ISO 13366—3：1997,Milk—Enumeration of somatic cells—Part 3：Fluoro—opto—electronic method ，MOD) 2004-04-16 发布 2004-06-01 实施前 言 本标准修改采用I S O 13366—1：1997《牛奶 体细胞测定方法 第一部分 显微镜法》、I S O 13366—2：1997《牛奶 体细胞测定方法 第二部分 电子粒子计数法》和ISO 13366—3：1997《牛奶 体细胞测定方法 第三部分 荧光光电计数法》。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准起草单位：农业部乳品质量监督检验测试中心、农业部食品质量监督检验测试中心（上海）、农业部食品质量监督检验测试中心(佳木斯)和农业部食品质量监督检验测试中心(石河子)。 本标准主要起草人：王金华、张宗城、刘宁、孟序、陆静、张春林、王南云、罗小玲、程春芝。 生鲜牛乳中体细胞测定方法 1 范围 本标准规定了生鲜牛乳中体细胞的测定方法。 本标准适用于标准样、体细胞仪的校准以及生鲜牛乳中体细胞数的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB 6682分析实验室用水规格和试验方法 3 产品分类 3．1 将测试的生鲜牛乳涂抹在载玻片上成样膜，干燥、染色，显微镜下对细胞核可被亚甲基蓝清晰染色的细胞计数。 3．2 除非另有说明，在分析中仅使用化学纯和蒸馏水。 3．2．1 95％。 3．2． 四氯乙烷(C2H2C14)或三氯乙烷(C2H3C13)。 3．2．(C16H18ClN3S·3H20)。 3．2．(CH3 COOH)。 3．2．(H3B03)。 3． 3．3．1500或×1 000，带刻度目镜、测微尺和机械台。 3．3．0．01 mL。 3．3． 3．3．65℃±5℃。 3．3．35℃±5℃。 3．3．40℃±10℃。 3．3．10μm。 3．3． 3．3．40℃～45℃。 3． 在250 mL三角瓶中加入54．0 mL乙醇(3．2．1)和40．0 mL四氯乙烷(3．2．2)，摇匀；在65℃水浴锅(3．3．4)中加热3 min，取出后加入0．6 g亚甲基蓝(3．2．3)，仔细混匀；降温后，置人冰箱中冷却至4℃；取出后，加入6．0 mL冰醋酸(3．2．4)，混匀后用砂芯漏斗(3．3．7)过滤；装入试剂瓶，常温贮存。 3．3．5．12℃～6℃条件下。若6 h内未测定，应加硼酸(3．2．5)防腐。硼酸在样品中的浓度不大于0．6 g／100 mL，贮存温度2℃～6℃，贮存时间不超过24 h。 3．5．235℃水浴锅(3．3．5)中加热5 min，摇匀后冷却至室温。 3．5．3(3．2．1)将载玻片(3．3．3)清洗后，用无尘镜头纸擦干，火焰烤干，冷却。 3．5．4(3．3．2)针头后抽取0．01 mL试样(3．5．2)，用无尘镜头纸擦干微量注射器针头外残样。将试样平整地注射在有外围的载玻片(3．3．3)上，立刻置于恒温箱(3．3．9)中，水平放置5 min，形成均匀厚度样膜。在电炉(3．3．6)上烤干，将载玻片上干燥样膜浸入染色溶液(3．4)中，计时10 min，取出后凉干。若室内湿度大，则可用干发型吹风机(3．3．8)吹干；然后，将染色的样膜浸入水中洗去剩余的染色溶液，干燥后防尘保存。 3．6 3．6．1(3．3．1)的载物台上，用自然光或为增大透射光强度用电光源、聚光镜头、油浸高倍镜。 3．6．2400个。 3．7 样品中体细胞数按式(1)计算。 ……………………………………………(1) 式中： ——样品中体细胞数，单位为个每毫升(个／mL)； ——显微