用非损伤微测技术研究肿瘤细胞的耐药性与其胞外H流变化的相….pdfVIP

生物物理学报 第二十四卷 第三期 二 八年六月 ACTA BIOPHYSICA SINICA Vol.24 No.3 Jun. 2008 用非损伤微测技术研究肿瘤细胞的耐药性 与其胞外H+流变化的相关性 1 2 3 1,4 宋瑾 ， 唐 勇 ， Ping Zhang ， 许 越 （1. 美国扬格非损伤技术中心，旭月 （北京）科技有限公司，北京 100080； 2. 北京中医医院，北京 110 180； 3. 耶鲁大学医学院，细胞和分子生理学系，纽黑文市，CT 06520 ，美国； 4. 马萨诸塞州立大学生物系，阿姆赫斯特市，MA 0 1003 ，美国） 摘要：介绍了人乳腺癌细胞 （药物敏感株MCF-7/S 及耐药株MCF-7/R ）在化疗药物阿霉素 （adriamycin ， ADR ）处理下，细胞外pH 和H+ 流动方向和速率的变化。为此，建立了一种基于非损伤微测技术 （non-invasive micro-test technique ，NMT ）的药物抗性研究方法 （drug resistance study method ，DRSM），该方法可用于研究器 官/ 组织/ 细胞外离子/ 分子活性与肿瘤细胞耐药性之间的相互关系。结果显示存在一个持续的并以固有振 形式 出现的胞外H+ 流现象。此外，耐药株净H+ 流在加ADR 前趋近于零，而敏感株净H+ 流呈明显内流。敏感株和耐 药株加ADR 后净H+ 均呈外流，但耐药株的净H+ 外流速率要高于敏感株5 倍。与净H+ 流动速率结果相一致的是 + 胞外的pH 也产生了相应的变化。因此，实验为胞外H 活性与肿瘤耐药性的相互关联提供了直接证据。 + ： ； ； 关键词 非损伤微测技术 H 浓度及流动速率 MCF-7 肿瘤细胞；化疗药物耐药 ： 中图分类号 R965.2 0 言 能够降低一些化疗药物的效果。其他一系列的机制 亦与此相关，包括酸化降低了细胞周期中处于分裂 论是正常细胞还是肿瘤细胞，细胞内pH 状态的细胞数，产生了选择性的凋亡抵抗表型和由 [5,6] （pHi ）是细胞维持各种生理功能的重要参数。为维 离子梯度决定的药物分布或离子俘获 。离子俘获 持pHi 的稳定，细胞在产酸和泌酸之间存在着动 模型预测，弱碱性化疗药物，如阿霉素、柔红霉素 态平衡。实体瘤的重要特点之一是细胞间质呈酸 和长春新碱在酸性环境中将离子化并聚集在更加酸 性 。磁 共 振光谱 法 （magnetic resonance 化的区室中，因此，肿瘤的酸性pHe 将有效地阻 spectroscopy，MRS ）揭示，肿瘤细胞的“Warburg 断药物进入细胞或中和药物，以及将药物隔绝在酸 效应”使肿瘤细胞比正常细胞产生更多的酸，但对 性的细胞囊泡中以阻止到达它们细胞内的作用靶 [7] 研究者 肿瘤细胞检测发现pHi 值较正常细胞 明显区别， 点，从而降低其对肿瘤细胞的杀伤作用 。 而细胞外pH （pHe ）和细胞内酸性囊泡内的pH 还观察到遗传背景相