人骨髓基质细胞生物学特性及其分化研究.pdf

人骨髓壮质细胞的生物学特性及其分化的研究 摘 要 第一部分人骨髓基质细胞的体外培养及其表型、组分分析 —-_—_-__p～PJl。—-__‘+—。一 摘要：目的 体外培养和扩增人骨髓基质细胞，并探讨其表型及 细胞组成。傍法体外静置贴壁培养和扩增人骨髓基质细胞，采用流 式细胞仪检狈0培养五代的骨髓基质细胞表面抗原CD33、CD34、 胞化学染色技术检测了不同代次儿童骨髓基质细胞的波形纤维蛋白 Muscle Willebrand Factor)的表达。结果人 Actinl和VIII因子相关抗原(Von 骨髓基质细胞体外可培养传代至第九代。第五代基质细胞S期细胞含 量仅占16．1％，说明其分裂增殖能力已下降；CD33、CD34表达极低， 说明该培养方法所得的第五代细胞基本无造血细胞。另外，Vimentin Muscle Actin 在传代过程中的表达水平逐渐下降，Desmin、cc—Smooth Willebrand 单克隆抗体和Von Factor抗体染色呈阴性胜论本文中的 骨髓基质细胞来源于间充质细胞，并不含血管内皮细胞；骨髓基质细 胞的组成和表型与体外培养条件有关。 、／ 、／ 关键词臂髓基质细胞j体外长期培养；表型；免疫细胞化学。 第二部分不同发商阶段的人骨髓基质细胞对多种病毒的敏感性 摘要 探讨不同发育阶段的人骨髓基质细胞对多种病毒的敏感 性。(方法采用静置贴壁培养法，体外长期培养了胎儿、儿童和成人 骨髓基质细胞，并将传至5代以上的骨髓基质细胞采用微量细胞病变 (CPE)法，开展了对5种病毒的敏感性试验。结果人骨髓基质细 人骨髓基质细胞的生物学特性及其分化的研究 中英文摘磋 HSV．II病毒是敏感的，本研究可为HSV病毒介导的基因治疗的靶细 胞选择提供依据。 关键词人骨髓基质细塍体外长期培养：微量细胞病变嵩病 毒敏感性 第三部分骨髓基质细胞IL一6的合成及其促诱生因素研究 摘要目的探讨LPS和IL一3对骨髓基质细胞IL．6合成的调节效 应。防法：体外静置培养建立基质细胞形成单层后，用IL。3(10ng／m1) B9细胞的细胞增殖法检测【L．6合成水平。结果骨髓基质细胞基础 条件下可合成低水平IL．6；LPS可促进其合成，最佳刺激浓度 胞基础条件下可分泌低水平IL．6参与造血调控，LPS和IL一3可通过 增加IL．6的合成而促进造血活动。 LPSIL一3 关键词：骨髓基质细胞IL一6 第四部分儿童骨髓基质细胞成骨分化的初步研究 摘要 目的为了研究骨髓基质细胞(BMSC)的成骨分化功能。 (方法采用细胞静置贴壁培养法，体外培养了BMSC，采用成骨诱导 培养法研究儿童BMSC的成骨效应。结果用成骨诱导培养法，可 使儿童BMSC骨钙素分泌水平比常规对照组升高8～10倍，并可见有 典型的成骨化的黑色矿化细胞臣≯钴论骨髓基质细胞具有成骨分化 V 功能。 关键词：骨髓基质细胞成骨分化 儿 垒量塑量耍型墼塑皇塑兰堑丝丝!!坌些塑堕壅 !墨兰塑望 cells