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克罗诺杆菌属O抗原分型系统建立及多样性形成机制研究.pdf 133页

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南开大学 博士学位论文 克罗诺杆菌属O抗原分型系统的建立及多样性形成机制研究 姓名:孙亚民 申请学位级别:博士 专业:微生物学 指导教师:冯露 2012-05 中文摘要 中文摘要 克罗诺杆菌属是最近新分类的一个属,目前包括7个命名的种 ————·I[:而豫D6口c玉B,.sakazakii,Cmalonaticus,Cmuytjensii,Cdublinensis,C turicensis,Ccondimenti,和Cuniversalis。克罗诺杆菌属是一种重要的食源性致 病菌,在多种食物中均分离到该属菌株。克罗诺杆菌属可导致任何年龄层人群 的疾病,尤其是免疫力低下的婴幼儿和老人,能够引起严重的坏死性小肠结肠 炎、败血症和脑膜炎。尽管感染率低,但治愈率低且致死性强(在受感染的儿 童中死亡率可高达33%.80%),已导致多起的脑膜炎和坏死性肠炎的散发和暴 sakazakii 发。除Cuniversalis,其他6种克罗诺杆菌属都有临床感染的报道。C 因其在临床上分离的最多,临床意义大而成为Cronobacter属中最重要的一种菌。 o抗原是热稳定抗原,位于革兰氏阴性菌表面,是脂多糖的重要组分。O抗 原具有很强的免疫原性并且是一些噬菌体的作用位点,这些因素使其受到较强 的选择压力并导致O抗原具有高度的多样性。O抗原重复单元是高度变化的, 这为革兰氏阴性细菌的血清分型提供基础。负责O抗原合成的基因簇通常位于 细菌染色体特定位置,O抗原的多样性主要是由于O抗原基因簇的遗传学多样 性造成的。O抗原基因簇中的基因可以被分为3类:单糖合成酶基因、糖基转移 酶基因和寡糖单位处理酶基因。 血清学分型为细菌分类奠定了基础,其在细菌的流行病学调查和预防控制 方面具有重要的意义。目前,克罗诺杆菌属的O抗原分型信息很少。在本研究 株茵鉴定为Csakazala'i菌株,基于这119株Csakazakii菌株,我们建立了一套 非特异性凝集反应,Ol、03和05类似一个血清群,彼此之间均有交叉反应, 需要相互吸收才能得到特异的血清型血清。所有的119株Csakazakii菌都分到 了这7个血清型中,其中01和02血清型包含的菌株最多,占到菌株总数的 69.7%。我们同时对Csakazakii的O抗原基因簇进行了限制性酶切多态性分析 (RFLP),结果显示,RFLP的分型结果与血清的分型结果完全一致,这也进一 步证明了血清学分型系统是准确的。本研究建立的Csakazakii的血清学分型系 ‘I 中文摘要 统将为克罗诺杆菌属的菌株分型提供基础。 本研究还针对整个克罗诺杆菌属的O抗原进行了系统的研究。在本研究中, sakazakii03.07血 我们确定了克罗诺杆菌属的12个新的O血清型,分别为C 清型、Cdublinensis01.03血清型、Cturicensis02.03血清型、C 02 muytjensii malonaticus 血清型和C 01血清型。并完成了这些血清型的0抗原基因簇的破 译和lO个O抗原结构解析。从整体上分析了克罗诺杆菌属O抗原基因簇的基本 特征和特殊特征,深入分析O抗原结构和O抗原基因簇之间的对应关系,并预 测了部分罕见单糖的合成途径。本研究发现,某些克罗诺杆菌属的。抗原基因

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