实验性大鼠脑出血后脑水肿及血肿周围组织中TNFα、ICAM1表达研究.pdfVIP

中 文 摘 要 实验性大最脑出血后脑水肿 及血肿周围组织中TNF-a、ICAM-1的表达研究 摘 要 目的:脑出血 (Intracerebralhemorrhage,ICH)是 严重危害人类生命健康的疾病。近年来的研究认为脑出血后 早期及以后的神经功能恶化除血肿进一步扩大因素外，主要 是血肿周围脑组织的继发性脑损伤和脑水肿所致。其病理机 制复杂，目前尚未完全阐明。迄今，对脑出血尚无明确有效 的治疗方法。因此，进一步研究脑出血后血肿周围组织继发 性损伤、水肿的病理机制意义重大。 最近一些研究发现，脑出血后血肿周围存在炎症反应， 并发现前炎性因子((TNF-a、工L-6,IFN-Y等)促使神经元及 血管内皮细胞中细胞间粘附分子一(intercellularadhesion molecule-1,ICAM-1)的表达。ICAM-1又促进T白细胞的粘 附、渗出，进一步促使免疫活性细胞在该处的激活与积聚， 从而加剧了炎症反应。本实验研究实验性大鼠脑出血后脑水 肿和血肿周围组织TNF-a,ICAM-1的表达。并探讨脑出血 后继发性脑损伤、脑水肿的发生机制，为临床治疗脑出血提 供理论依据。 方法:①建立脑出血及假手术动物模型，进行行为学评 分:将32只SD大鼠随机分为脑出血组((16只)和假手术组(16 只)，利用立体定向仪建立模型。出血组向大鼠尾状核注入不 抗凝自体动脉血50W,假手术组只进针，不注血。在手术后 6h,24h,48h,72h(n=4)对大鼠进行行为学评分。包括 中 文 摘 要 Longa评分法、肢体对称试验评分法、Berderson评分法、平 衡木评分法。②建立脑出血及假手术模型，进行脑含水量测 定:将成年健康雄性SD大鼠32只，随机分为两组:脑出血 组以6只)，假手术组(16只)，在手术6h,24h,48h,72h(n=4) 时，将大鼠麻醉后，断头处死，取出大脑，用干湿法测定相 应时间点的脑组织含水量。③建立脑出血及假手术模型，测 定脑组织中TNF-a、ICAM-1。将成年健康雄性SD大鼠56 只，随机分为两组:脑出血组((28只)，假手术组(28只)。将 脑出血组及假手术组于手术后3h,6h,12h,24h,48h,72h, 7d.(n=4)，进行麻醉、灌注，然后取出大脑固定、包埋、 切片。应用免疫组化方法检测血肿周围脑组织不同时相点 TNF-。和ICAM-1。用放大400倍的光学显微镜来计数血肿周 围组织的阳性细胞数，每个时相点随机选取不重叠5个视野。 进行统计学处理。 结果:①脑出血后大鼠在不同时间点出现行为学异常， 其中6小时与对照组相比无显著统计学差异、考虑为麻醉药 品和手术创伤所致;24小时~72小时行为学异常与对照组 相比有显著意义，提示行为学异常与脑损害程度一致。②脑 组织含水量在6小时，实验组与对照组无差别，实验组24 小时脑含水量开始升高，48小时达到高峰，持续升高到 72 小时，p0.05，与对照组相比有统计学意义;且血肿同侧与 对侧脑组织含水量也有差别，血肿同侧脑组织含水量高于血 肿对侧脑组织含水量;实验组24小时、48小时、72小时与 6小时之间有统计学差别，对照组各时间点之间无统计学差 异。}3TNF-a免疫组化染色结果:脑出血组血肿周围可见 TNF-a表达的阳性细胞数3h为6.811.63，假手术组为1.2 中 文 摘 要 士0.84，两组相比PO.01，有显著性差异:手术后6h脑出 血组为9.2士1.79,假手术组为1.6士1.14，两组相比PO.01, 有显著性差异;手术后12h脑出血组为13.4士2.07，假手术 组为1.8+,0.84，两组相比PO.01，有显著性差异;手术后 24h脑出血组为44.8士4.55，假手术组为2.6士1.40，两组 相比PO.01，有显著性差异:手术后48h脑出血组为58.4 士6.19,假手术组为2.0士1.12，两组相比PO.01，有显著 性差异;手术后72h脑出血组为49士2.91，假手术组为1.2 士0.84，两组相比PO.0l，有显著性差异;手术后7d脑出 血组为6.4士1.14,假手术组为1.1士0.62，