基于响应面设计脂肪酶Novo435 催化合成甘油二酯的工艺优化.pdfVIP

第７卷第５期 生　物　加　工　过　程 Ｖｏｌ．７Ｎｏ．５ ２００９年９月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｓｅｐ．２００９ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１７６２－３６７８．２００９．０５．００３ 基于响应面设计脂肪酶Ｎｏｖｏ４３５催化合成 甘油二酯的工艺优化 李　相，刘　云，杨江科 （华中科技大学　生命科学与技术学院　分子生物物理教育部重点实验室，武汉 ４３００７４） 摘　要：以甘油、油酸为原料，优化在无溶剂体系中以固定化脂肪酶Ｎｏｖｏ４３５催化合成甘油二酯（ｄｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＤＡＧ） 的工艺。系统考察底物摩尔比（油酸／甘油）、反应温度、时间和加酶量等因素对油酸转化率和甘油二酯含量影响的 基础上，利用响应面试验设计优化各主效因子，并经回归分析获得最优的工艺条件。所得最优条件：油酸与甘油底 物摩尔比２２７、反应温度４８１４℃、反应时间６３ｈ、加酶量１６８％。在此条件下，实验测得油酸转化率为４５４２％， 甘油二酯质量分数为７００１％，与响应面模型预测值吻合。 关键词：脂肪酶Ｎｏｖｏ４３５；甘油二酯；响应面设计 中图分类号：ＴＱ６４１　　　　文献标志码：Ａ　　　　文章编号：１６７２－３６７８（２００９）０５－００１３－０６ ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＮｏｖｏ４３５ｌｉｐａｓｅｃａｔａｌｙｚｅｄｄｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｙｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ＬＩＸｉａｎｇ，ＬＩＵＹｕｎ，ＹＡＮＧＪｉａｎｇｋｅ （ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｐｈｙｓｉｃｓｏｆｔｈｅＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ＨｕａｚｈｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７４，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｅｘｐｌｏｒｅａｎｏｖｅｌｍｅｔｈｏｄｔｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｄｅｇｌｙｃｅｒｉｄｅ（ＤＡＧ），ｕｓｉｎｇｔｈｅｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄｌｉ ｐａｓｅＮｏｖｏ４３５ａｓｔｈｅｃａｔａｌｙｓｔ，ｔｈｅｇｌｙｃｅｒｏｌａｎｄｔｈｅｏｌｅｉｃａｃｉｄａｒｅｓｕｂｓｔｒａｔｅ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｏｌｅｉｃａｃｉｄ／ ｇｌｙｃｅｒｏｌｍｏｌａｒｒａｔｉｏ，ｒｅａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｒｅａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ，ａｎｄｅｎｚｙｍｅｌｏａｄｏｎｔｈｅｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｒａｔｅｏｆｔｈｅ ｏｌｅｉｃａｃｉｄａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＤＡＧｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅｍａｊｏｒｉｍｐａｃｔｆａｃｔｏｒｓｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄｂｙｕｓｉｎｇｒｅ ｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｐａｒａｍｅｔｅｒｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｏｌｅｉｃａｃｉｄｔｏｇｌｙｃｅｒｏｌｍｏｌａｒｒａｔｉｏ ２２７，ｒｅａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ４８１４℃，ｒｅａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ６３ｈ，ａｎｄｅｎｚｙｍｅｌｏａｄ１６８％．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎ ｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｒａｔｅｏｆｔｈｅｏｌｅｉｃａｃｉｄａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＤＡＧｗｅｒｅ４５４２％ ａｎｄ７００１％． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｎｏｖｏ４３５；ｄｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ；ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ 　　甘油二酯（ｄｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＤＡＧ）是油脂的天然成分。 剂，能减少体内的脂肪堆积，预防和治疗高血脂及相 根据酰基与甘油羟基结合的位置不同可将其分为 关疾病［１－３］。在医药行业中，甘油二酯不仅可作为药 １，２ ＤＡＧ和１，３ ＤＡＧ２类。甘油二酯不仅能改善 物活性成分的分散