拟穴青蟹抗菌肽CrusSp基因克隆表达及抑菌活性分析.pdfVIP

( ) 华南师范大学学报 自然科学版 2011 2 JOURNAL OF SOUTH CHINA NORMAL UNIVERSITY 2011 1 年 月 年第 期 Feb． 2011 (NATURAL SCIENCE EDITION) No． 1，2011 文章编号:1000 － 5463 (2011)01 － 0093 － 05 拟穴青蟹抗菌肽 CrusSp 基因克隆表达 及抑菌活性分析 1 1 2 1* 1* ， ， ， ， 徐栋梁 李洁颖 彭永鹤 夏立新 刘志刚 (1． ， 518060 ;2 ． ， 518057 ) 深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所 广东深圳 深圳市圣西马生物技术有限公司 广东深圳 : RNA ， RT － PCR CrusSp cDNA ， pET － 32a 摘要 从拟穴青蟹血淋巴细胞提取总 经 扩增编码 成熟肽的 序列 克隆至 (+ ) ， E． coli OrigamiTM (DE3) CrusSp ， Ni2 + CrusSp ， 表达载体中 转化至 中表达 蛋白 通过 亲和层析柱纯化获得 蛋白 表 CrusSp 10. 27 ku ， 8. 54 ， CrusSp ． 达出的 蛋白相对分子量约 等电点为 滤纸片扩散法结果显示 蛋白抑制绿色木霉 : ; ; ; ; 关键词 拟穴青蟹 抗菌肽 克隆 纯化 抑菌活性 中图分类号:Q786 文献标志码:A (Antimicrobial peptides ，AMPs) CrusSp ) ， E． coli Origa- 抗菌肽 以其独特 称 的重组大肠杆菌菌株 转化 TM ． mi (DE ) CrusSp ， CrusSp 的优点显示出良好的应用与发展前景 抗菌肽是生 3 中表达了 蛋白 研究了 蛋 物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子 ， 白的抗真菌和细菌的生物活性 为进一步探讨其抗 肽， 、 ， 广泛存在于各类动物 植物和微生物体内 是天