在我国内蒙古发现的一例血红蛋白D旁遮普及其化学结构分析.pdfVIP

遗传学报，9(3);228--232，1982 ActaCeneticaSinica 在我国内蒙古发现的一例血红蛋白 1J旁遮普及其化学结构分析’‘ 梁植权 陶海南 罗会元 黄尚志 （中国医学科学院基PILL]医学研究所生物化学 （中国医学科学院基础医学研究所 及分子生物学研究室，北京） 医学遗传研究室，北京） 藤玉勤 宋 敏 刘淑萍 （内蒙古医学院生物化学教研室，呼和浩特） 血红蛋白D旁遮普 H（bDPunjab）最先发现于美国洛杉矶一白人家庭中12〔1，随后在世 界其他地区也有发现。H.Lehmann，曾提出HbDPunjab基因可能来源于蒙古族这一假 说1【21。为此，我们到呼和浩特市对蒙古族学生进行了普查。在474名受检者中，查出一例 HbE[21和一例HbDPunjab，本文报道此例HbDPunjab的化学结构分析结果。 材 料 与 方 法 普查时用Whatman3*滤纸采取耳垂血，干燥保存，用0.1多皂角素一KCN溶液浸出血 红蛋白溶液，进行碱性 p（H8.6)醋酸纤维素薄膜电泳二〔。用于结构分析的血样系以肝 素抗凝的静脉血。血液学检查用通用方法。血红蛋白的制备及珠蛋白干粉的制备均按前 述方法进行1【,131。按Clegg等人的方法，〔，‘用CM-纤维素 C（M--52）柱层析法，分离珠蛋白 肤链。按前述方法[1,131将分离所得之正常及异常夕肤链氨乙基化、脱盐和冰冻干燥。然后 按Clegg法并加以改进的方法[1,［131进行胰蛋白酶水解，水解温度370C，时间2小时。水解 终了时，将反应管置95℃左右水浴中3分钟以终止酶解反应。离心分离出上清部分，冰 冻千燥。按前述方法进行指纹图谱分析L1,131。异常肤斑用1M冰乙酸从指纹图上洗脱下 来，冰冻干燥后，以5.7N恒沸盐酸一10mm草酸一2mM琉基乙醇溶液将干燥的肤段移人氨 基酸水解管中，在充氮、减压下封闭水解管，置110 烤箱中水解18小时。氨基酸定量分 析用氨基酸自动分析仪进行。异常肤段的N-末端氨基酸用Chang氏DABITC/PITC双 偶联微量法测定[7,81，以进一步确定其氨基酸的取代。 乙烯亚胺 E（th贝enimine）系本实验室按星野法3，〔合成，沸点范围56-570C，其他有机 溶剂均系重蒸的高纯试剂。 结 果 先证者阿XXX，男，23岁，汉蒙混血儿，原籍内蒙古自治区巴彦淖尔盟五原县。先 本文于1981年7月3日收到。 1)本文曾在中国遗传学会人类及医学遗传委员会全国血红蛋白病学术会议 （1981年1月南宁）上宣读。 本文异常血红蛋白的末端氨基酸测定由陈松森同志协助完成；承蒙内蒙古医学院附属医院陈全将教授、糜翠兰 大夫协助体检，袁廷馨及张秀文同志协助作细胞学检查，特此致谢。 3期 梁植权等：在我国内蒙古发现的一例血红蛋白D旁遮普及其化学结构分析 229 证者既往体健，无临床表现，体检未见异常。肝脾及淋巴结不肿大。血色素15g/dl,RBC 589万／mm3，血球压积50外，红细胞形态正常，红细胞脆性实验正常。 先证者血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳 p（H二8.6)，有一异常区带，位于HbA和HbA2, 之间，相当于HbG的位置 （图1)。光密度扫描法测得各区带相对含量为：HbA55.2务， HbD 42.8％。HbA,1.9％。 图1 血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳 图2 醋酸纤维薄膜碱性肤链电泳 Fig.1Celluloseacetateelectrophoretic Fig.2Celluloseacetateelectrophoretic patternsofhemolysates(pH8．6) patternsofglobinchains(pH8.6) 异丙醇沉淀实验阴性，碱变性实验测得HbF0.83务。 酷酸纤维薄