对虾WSSV+RNAi技术建立及初步应用.pdf

对虾WSSVRNAi技术建立及初步应用 吴越 导 师：何建国教授 专 业：水生生物学 摘 要 Virus)已成为养 背景； 对虾白斑综合征病毒骼sV(whi托SpotSyndrome 殖对虾的一主要病原，给对虾养殖业造成了巨大损失，弄清其侵染机理是有效防 治的基础。本试验使用烈Ai的方法对其几个重要蛋自的基因进行了研究，分析这 几个基因被干涉掉后对wssv侵染的影响。这几个基因分别是DNA聚合酶基因、核 苷酸还原酶基因、胸苷激酶基因、胸苷酸激酶基因、衣壳蛋白VP24基因和囊膜蛋 白、rP28基因，RNAi是一种新的并极为有效的基因功能研究方法。 方法：使用针对于每个蛋白基因的裸siVA在凡纳对虾体内降低目的基因的 表达。用半定量RT_PcR检测基因表达量。用对虾死亡状况和荧光定量PCR来鉴定 各基因的沉默对WSSV侵染的影响。 结果；试验数据表明siVA在虾体内显著地降低了甚的基因地表达量和wsSV 的扩增速度，并且对延缓对虾的死亡也起到一定作用。 结论：特异的siRNA有效遗抑莉了wsSV基因地表达。DNA聚合酶、核苷酸 还原酶、胸苷酸激酶、衣壳蛋白vP24和囊膜蛋白、，P28对WSSV的侵染是必不 可少的，而胸苷激酶WSSV似乎可以使用宿主的胸苷激酶作为替代品。 凡纳滨对虾 RNAi and of Establishment PreliminaryApplication WSSVof in of Shrimp Study Technique Yue≯地 He,Professor SupervisedbyJianguo in Majorhydrobiology Abstract IntroductionWhite a of Spot Virus(WSSV)isprimarypathogenfanning Syndrome causeda tosstothe inworldwide， industry shrimp．and huge shrimpaquaculture base to themechanismofvirusinfectionisthe tofind controlthe Elucidating ways to of in disease．RNA use