Baclofen对大鼠新鲜分离ORG神经元GABA和NMDA激活电流的抑制作用.pdfVIP

维普资讯 第 6卷 第 2期 石河子大学学报 (自然科学版) Vo1．6 No．2 2002年 6月 JournalofShiheziUniversity(NaturalScience) Jun．2002 文章编号：1007—7383(2002)02—0091—04 Baclofen对大 鼠新鲜分离 DRG神经元 GABA和 NMDA激活 电流的抑制作用 赵义梅 ，木拉提 ，王英姿 ，呼海燕 ，司军强 (1石河子大学隈学院医学系，新疆 石河子 832002；2石河子大学医学院第一附属医院，新疆 石河子 832002) 摘要 ： 用拿细胞膜片箝技术在大鼠新鲜分离的背根神经节 (DRG)细胞上观察到baclofen对GABA和 NMDA激活电 流有调制作用。单独给予 DRG细胞 baclofen(1～100rtmol／L)未记录到可测的电流改变，但预加 baclofen对GABA和 NMDA激活电流具有明显的抑制作用，且呈剂量依赖性 100ranol／Lbaclofen对 GABA和 NMDA激活电流分别抑制 (51．2-t-10．9)％(X±SE =8，P0．01)和(64．1±21．1)％(X±SE =6，P0．O1)，此抑制作用是可逆的，可被 GABAR受体拮抗剂~clofen(100l／mol／L)所取消 (n=4) 关键词：背根神经节；baclofen；GABA受体 ；NMDA受体 ；测制作用 中图分类号：R741．O44 文献标识码-A 已有资料证明：背根神经节 (DRG)神经元膜存 胸腰段脊柱 。由脊柱正中剖开成两半，置氧饱和之 在有 GABAB和 GABA^受体，它们 以单独或共存的 DMEM液 (dubeceo’Smodifiedeagle’Smedium)内，pH 形式存在 ，还有报道表明：DRG神经元膜存在 7．4，溶液渗透压为340mosm／kg。由剖开的椎管内 有NMDA受体Lj或谷氨酸 (Glu)受体l6J。当这些受 侧取出神经节及相连的神经根 (前 、后根)和脊神经， 体共存于同一细胞膜时，它们激活后彼此间有可能 在体视显微镜下用精细角膜剪及游丝镊，仔细剪除 发生相互影响。我们的研究工作证实了 GABAB受 相连神经和周围的结缔组织被膜，将清除干净的 体的特异性激动剂 baelofen对大 鼠DRG神经元 DRG尽可能地剪碎 ，置培养皿 内加 trypsin(typeUI， GABA 受体介导的去极化反应有 明显 的抑制作 Sigma)0．5mg／mL，eollagenase(typeJ-A，Sigma)1．0 用l4。Morrlsett等 (1991年)的研究表 明，baelofen对 mg／mL，Dnase(typeUI，Sigma)0．1mg／mL于试管中， 大 鼠海马突触传递的NMDA成分具有抑制作用ETi。 在恒温振荡水浴器 (35cI=，80次 ／min)中孵育 4o 我们应用全细胞膜片箝技术研究大鼠DRG神经元 nfin。孵 育毕，加入适量 soyabeantrypsininhibitor 膜 GABAB受体激活对 NMDA和 GABAA受体介导的 (type1J．s’Simga)以终止酶的消化作用。将经上述 膜电流反应的影响。 酶和机械分离的DRG细胞转移至一 36mm培养皿 内，放在倒置显微镜的载物台上静置至少 30min。 1 材料与方法 全细胞膜片箝记录所用的仪器为国产 PC．2B型 膜片箝放大器(华中理工大学 自控系研制)。玻璃微 有关大 鼠DRG