7章基因工程的应用.ppt

第七章 基因工程应用 制作生物芯片的材料必须满足的要求： 载体表面具有可进行化学反应的活性基团，便于与生物分子进行偶联。 载体为惰性的并有足够的稳定性。 单位载体结合的DNA分子能达到最佳容量。 载体具有良好的生物兼容性。 探针DNA或RNA分子 生物芯片的制作方法 点接触法 喷墨法 光刻DNA合成法 制作基因芯片的DNA样品主要来源于从细胞中提取的mRNA反转录后的cDNA文库。 此外还可利用PCR扩增技术和DNA固相合成技术获得所需要的各种基因序列。 生物芯片的制作方法 7.5.1.2 基因芯片杂交 基因芯片技术的基础——分子杂交 在进行分子杂交前须对靶DNA分子进行扩增以提高反应的灵敏度，然后对靶DNA进行标记。 样品的标记方法 荧光标记法 生物素标记法 同位素标记法 7.5.1.3 基因芯片的扫读与分析 扫读装置——芯片扫描仪 激光共聚焦芯片扫描仪 CCD芯片扫描仪 芯片扫描仪 对生物芯片扫描数据的采集、处理、分析和报告是生物芯片技术中的一个重要环节，它由复杂的计算机来完成。 7.5.2 基因芯片的应用 临床用药 新药筛选 基因诊断 基因表达 水平的检测 基因测序 基因芯片 的应用 抗真菌转基因植物 几丁质酶转基因植物 植物抗毒素转基因植物 7.2.2 抗逆转基因植物 逆境（stress）：是指使植物产生伤害的环境，又称胁迫。如寒冷、冰冻、炎热、干旱、盐渍等。 胁迫分为生物胁迫和非生物胁迫两大类。 生物胁迫是指病害、虫害和杂草等； 非生物胁迫则指不利的理化因子，其详细分类见下图： 非生物 胁迫 温度 水 辐射 化学 因素 风、雨、 雪、声、 磁、电 低温 高温 涝 干旱 红外光 可见光 紫外线 离子 辐射 盐类 离子 气体 除草剂 冷害 冻害 抗逆转基因植物 抗盐转基因植物 抗旱转基因植物 抗冻转基因植物 抗除草剂转基因植物 7.2.3 药用转基因植物 与原核生物表达系统和动物表达系统相比，转基因植物医药生物反应器生产重组蛋白具有六大优点： 植物细胞的全能性。 植物种植是最经济的蛋白质生产系统。 植物是能够大规模生产蛋白质的生产系统。 用植物生产疫苗简单、方便。 植物具有完整的真核细胞表达系统。 表达产物无毒性和副作用，安全可靠，无残存DNA和潜在致病、致癌性。 药用转基因植物 （表现在三方面） 转基因植物表达抗体 转基因植物表达疫苗 转基因植物生产药用蛋白 7.2.4 转基因植物食品 利用植物基因工程提高作物的产量 利用植物基因工程改良作物的品质 7.2.5 其它转基因植物 抗早衰转基因植物 改变花色、花型的转基因植物 利用转基因植物生产可降解塑料 7.3 转基因动物 转基因动物：是指人类按照自己的意愿有目的、有计划、有根据、有预见地将外源基因导入动物细胞内，通过与染色体基因组进行稳定的整合，将生物性状传递给后代动物。 转基因动物的应用 利用转基因动物改良动物品种 转基因动物作为生物反应器 转基因动物筛选药物 7.3.1 利用转基因动物改良动物品种 利用转基因动物技术提高动物的繁育速度 利用转基因动物技术改善动物品质 利用转基因动物技术培育抗病害动物品系 7.3.2 转基因动物作为生物反应器 转基因动物生物反应器 动物乳腺生物反应器 动物血液生物反应器 哺乳动物分泌腺体生物反应器 7.3.3 转基因动物筛选药物（自学） 利用转基因动物筛选抗肿瘤药物 利用转基因动物筛选抗艾滋病药物 利用转基因动物筛选抗抗其他疾病药物 7.3.4 转基因动物应用于人体器官移植（自学） 7.4 基因治疗 基因治疗：是指以正常的基因替代或修补病人细胞中的缺陷基因从而达到治疗疾病的目的，它是治疗分子疾病最有效的手段之一。 基因治疗 体细胞基因治疗 生殖细胞基因治疗 1990年9月14日，美国年仅4岁的女孩阿尚蒂接受了世界上第一例基因治疗临床试验。 基因治疗的策略 补充策略 纠正策略 限制策略 无中生有 基因治疗 活体直接转移（in vivo）：将外源基因通过载体直接注射到肌肉、血管等靶组织或通过口服、喷雾、皮下涂抹等方式直接被试验个体的靶部位吸收。该法操作简便，易于推广，但目前尚未成熟，存在疗效短、免疫排斥及基因转移载体在体内随机分布等安全性等问题。该法虽有种种缺陷，仍不失为基因治疗发展的最终趋势。 离体转移（ex vivo）：将试验对象的靶细胞取出，体外培养导入基因后再重新输回试验者体内。该法比较经典，安全有效且易控制，但是步骤多、操作复杂，患者接受程度低，难以大规模推广。 基因治疗 体内基因治疗：将含外源基因的真核细胞表达载体直接导入人体内。 体外基因治疗：将含有外源基因的表达载体导入人体自身或异体细胞，经体外细胞扩增后输回人体。 基因治疗技术的四个环节 基因诊断 基因分离 载体构建 基因转移 用于治疗