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§ 1 基本原理 当T = 36.8%时(A = 0.434) ,误差最小, 为2.72% (假设△T = 1%) 吸光度读数范围一般控制在0.2 ~ 0.8。 1 酸碱解离常数的测定 一元弱酸HA HB = H++ B- Ka = [B-] [H+] /[HB] c = [HB]+ [B-] A =KHB [HB]+ KB [B-] AHB =KHB c AB =KB c §5 吸光光度法的应用 2 络合物组成(络合比)的测定 (1)摩尔比法:固定金属离子浓度,改变络合剂的 浓度,配制溶液。测定吸光度,通过作图法 (A-cR/ cM)求络合比。 (2)等摩尔连续变化法:使金属离子与络合剂的总 浓度保持不变,改变金属离子与络合剂的浓度比。 测定吸光度,通过作图法(A-cM/ (cM+ cR ) ) 求络合比。 期末考试 (1)成绩:作业 25%,笔试 75% (2)考试方式:闭卷 (3)考试时间:13周 (4)考试题型: 选择题、填空题、判断题、 简答题、计算题 * 第八章 吸光光度法( Absorptiometry) 分光光度法(Spectrophotometry) 一、光的波粒二象性 波动性:λ、υ、c υ= c /λ c = 3×108 m /s h = 6.63×10-34J·s 1nm = 10-9 m =10 ? 粒子性: E = h υ 1ev = 1.602×10-19 J 650-750 600-650 580-600 500-560 490-560 450-480 400-450 450-480 物质的颜色与其吸收光波长的关系 分子内部的三种运动及能级 外层电子运动----电子能级 二、物质对光的选择性吸收 原 子 振 动----振动能级 分子 转动----转动能级 2. Molecular energy level 分子能级 Energy level transition 分子能级跃迁 基态分子 hυ 激发态分子 Heat or Light 三、光的吸收定律—— Lambert - Beer law 1. 透光度和吸光度 I 0 I r I t I0 = It + Ir + Ia≈ It + Ia 透光度Transmittance: T = It / I0 0 ~ 100% 吸光度Absorbance: A = -lg T 0 ~ ∞ 吸光度具有加和性。 2. Lambert - Beer law A = lg I0 / It = - lgT = K b c 当一束 单色光 通过溶液时,溶液的吸光度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。 3. 吸收系数 吸收系数与物质的性质、溶剂、入射光波长及温度等因素有关。在一定条件下为常数。 当c单位用mol / L、b的单位用 cm表示时, 吸收系数用ε表示,称摩尔吸收系数(molar absorptivity)。其大小反映测定方法灵敏度的高低。 § 2 分光光度计及吸收光谱 Spectrophotometer and absorption spectrum Source Mono - chromator Detector Indicator Absorption Cell 单色器 检测器 光源 吸收池 显示器 一、分光光度计 光源 发射波长( n m ) 使用波长( n m ) 钨灯 320~2500 350~1000 氢灯 150~400 200~350 氘灯 1. 光源 (Light Source) 2. 单色器 (Monochromator) 狭缝( Slit ):狭逢宽度:mm; 光谱通带:nm 色散元件 Dispersing Element 棱镜(Prisms ):玻璃棱镜、石英棱镜 光栅( Gratings): 1200 / mm 准直镜(Collimating Mirror) prism (gra
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