%af%b1导人晶状体上皮细胞凋亡机制研究.pdfVIP

·916· ．论著． 三氧化二砷诱导人晶状体上皮细胞凋亡的 机制研究 张红刘平于旭辉宋甄 【摘要】 目的研究三氧化二砷(A820，)对离体培养的人晶状体上皮细胞(FHLl24)的凋亡及 其作用机制。方法实验研究。四甲基偶氮唑盐比色法观察As：O，对FHLl24细胞的抑制作用；原 位缺口末端标记(TuNEL)法测定细胞凋亡；Taqm明实时荧光定量PCR检测基因表达的变化；荧光显 微镜动态监测细胞内ca“浓度的变化。As：O，对FHLl24细胞的生长抑制和细胞内Ca2+浓度的变化 采用f检验进行分析；3种基因不同处理组间表达水平差异的比较采用wilks’入检验；单个基因比较 采用LSD-f检验。结果A暑203(3×10～～1×lo—moL／L)对FHLl24细胞的作用呈浓度依赖性， 1I^胂彬L As203即可显著抑制FHLl24细胞的生长，半效抑制量(Ic∞)为1．5岬彬L。TuNEL检测 证实A8203诱导FHLl24细胞凋亡，引起FHLl24细胞DNA断裂。实时定量荧光PCR结果显示， As：0，可以引起FHLl24细胞与内质网应激信号传导有关的基因产物EIF2A，ERNl和ATF6显著增 加(罗=8．51，P=O．0005)。细胞内Ca2+测定显示A8：O，降低细胞内ca2+浓度，从而降低了ca2+信号 的峰值。20峥moL／LAs203孵育30lllin后，峰值降低了(66．34±4．47)％(P=0．0018)，60ⅡIin则降 低了(96．95±7．98)％(P=0．0002)。20岬∥LAs203使Ca2+内流幅值及速度分别降低了 (22．59±2。98)％和(39．69±6．01)％。结论As203抑制FHLl24细胞的生长并诱导细胞凋亡，诱 导内质网应激可能是其重要作用机制之一。r中华腰群杂岙，2DD墨锨9J6．92缈 【关键词】 氧化物；砷剂； 晶体；上皮细胞；细胞凋亡； 白内障 M∞hanismof盯咖ictrio】dde叫uced 互n cIlltIIredhu咖le璐 cens ap叩tosis epitheⅡ啪 zHANG zkm F讥tCt溅m Ho鸭，nUPing，YUXu一槭，SoNGEyeHos曲m，tk Hos吨越碍H凹b流Me幽：越 ‰觇搿毋，砒r6i，lJ5DODJ，吼iM 凸哗碱增口l}￡l|暑Dr：删AA络王硒馏，g玎碓菇：矗舷拓瑶DD7@幻t，加正∞m To e：髓ct8of啪eIIic hum锄lens 【Abstra肚】objectiw8tudycytot商c tri商de(As203)蚰tlle to mech枷smfortllesedkct8．MeⅡIo凼Intllis 印itheli啪ceU8锄didenti每thebiological experimental culturedin 7 8minimume8sentialⅡle出um gtudy，hum明leIlsepitlleliumcells(FHLl24cell8)were EagIe witll5％fetalsenlnLf11leeffbcts0f FHLl24 咖)pl啪ented calf w唧testedby As，O，on cell8舯mh MrI-I’。 彻d wasdetectedTUNEL weredetectedreal．time a1)oIytosis by assay．Genechanges b15r PCR(TaqImm)． in calciumlevel ceU wereⅡlea8u陀d nuo