抗纤复方对人α1(I)前胶原基因启动子活性的影响.pdfVIP

694 中国中西医结合杂志 2002年 9月第 22卷第 9期 · 博 士之 窗 · 抗纤复方对人 1(I)前胶原基因启动子活性的影响* 赵 钢 张 斌 陈建杰 王灵 台 内容提要 目的 ：探讨抗纤复方 (AFC)对人 a(I)前胶原基 因启动子活性 的作用及其机制 。方法 ：以含 人 a(I)前胶原基 因上流 2．3kb，0．8kb，476bp，173bp启动子 片段 为研 究靶序 列，以氯霉素 乙酰基转移酶 (CAT)为报告基 因，构建基 因重组质粒 ，转染成纤维细胞 (NIH3T3)，建立稳 定 的 a1(I)前胶原启动子转染 细胞体 系，用抗纤复方和 (或)转移生长 因子 (TGFf3】)处理 NIH3T3细胞，测定 CAT活性。结果 ：(1)抗纤 复 方 能够抑制 a1(I)前胶原启动子报 导基 因质粒 phCAT—Ca1(I)2．3，phCAT—Ca1(I)0．8，phCAT—Ca1(I) 0．4的活性 ，不能抑制 a](I)前胶原启动子报 导基 因质粒 phCAT—Ccc](I)0．1的活性 ；(2)TGF 能促进 ph— CAT—Ca(I)2．3的活性 ，抗纤复方能桔抗 TGF 这一促进作用。结论 ：抗纤复方能够作用于胶原 a(I)基 因调控 片段 ，抑 制胶原合 成。 关键词 抗纤复方 胶原 启动子 转移生长 因子 G1 EffectofAnti-fibrosisCompoundonActivityofHumana1(I)PrecollagenGenePromoterZHAO Gang， ZHANGBin，CHEN Jian—jie，etalShuguangHospital，ShanghaiTCM University，Shanghai(200021) objective：TostudytheeffectofAnti—fibrosisCompound(AFC)onactivityofhumana1(I)precollagen genepromoter(PGP—a1)anditsmechanism．Methods：SegmentscontainingphCAT—C 1(I)2．3，phCAT—C 1 (I)0．8，phCAT—Ca1(I)0．4andphCAT—Ca1(I)0．1weretakenasseriesoftargets，andchloramphenicol acetyltransferase(CAT)asreportergene，toconstructgenerecombinationplasmid，transform intoNIH3T3， andmakeastablePGP—Q1transfectioncellline．ItwastreatedbyAFCand／ortransforminggrowthfactorp1 (TGFp1)，andtheCATactivitywasassessed．Results：(1)AFCcouldinhibitthepromoterphCAT—Ca1(I) 2．3，phCAT—Ca1(I)0．8，phCAT—Ca 1(I)0．4activity，butshowednoeffectonphCAT—Ca1(I)0．1activity． (2)TGFp1couldpromotetheactivityofphCAT—Ca1(I)2．3，AFCcouldantagonizethepromotionofTGF~31． Conclusion：AFCcouldspecificallyaffectthecollagena1(I)generegulationsegment，inhibitthesynthesisof collagen． Keywords Anti—fibrosisCo mpound，collagen，promoter，transforminggrowthfactorp1 有研究显示抗纤复方具有抑制肝星形细胞 (hep— 制剂原液 由上海 中医药大学 附属曙光医院制剂 中心按 aticstellatecell，HSC)和肌成纤维样细胞 (myofibrob— 既定工艺制备 (1g／ml，pH5．9)，用 DMEM 培养液将 last，MFB)生长，减少胶 原蛋 白沉积 的抗肝 纤维化作