贝氏柯克斯体实时荧光定量PCR方法的建立及对云南鼠标本检测.pdfVIP

传染病信息2009年第22卷第6期 ．345． 贝氏柯克斯体实时荧光定量PCR方法的建立及对云南鼠标本检测 亚红祥①② 赫 兢③ 张丽娟① 白 丽② ①中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 北京 102206 (大理学院 大理 671000 ③解放军第三。二医院 北京 100039 摘 要 目的 建立贝氏柯克斯体荧光定量PCR方法并应用于云南省鼠标本的检测。方法 根据贝氏柯克斯体 ISlllla基因 设计引物和探针，以克隆的ISlllla基因片断(485bp)作标准DNA模板 ，建立实时荧光定量 PCR检测方法 ，并与普通巢式PCR方 法进行比较。采用2种方法对云南玉溪 自然界采集的鼠各类标本进行检测分析 ，计算2种方法的检出率。结果 实时荧光定量 PCR标准 曲线的循环阈值(cyclethreshold，Ct)与模板拷贝数呈 良好的线性关系 (r一0．999)，重复性测试