现代仪器分析(UV-Vis)(ok).pptVIP

紫外—可见分光高度法 Introduction 分子光谱概述 分子光谱的产生 分子光谱类型 实例 光谱吸收定律——朗伯-比尔定律 光谱吸收定律——朗伯-比尔定律 电子光谱产生 有机化合物的电子光谱 跃迁类型 几个概念 主要有机物----烃及其衍生物 主要有机物----羰基化合物 主要有机物----苯及其衍生物 无机化合物的电子光谱 溶剂的影响 仪器组成类型 主要组成部件 仪器组成类型 仪器类型 应用实验技术 实验技术 测定条件的选择 反应条件的选择 共存离子干扰的消除方法 分析应用 定性分析 定量分析 （1）单一物质的分析 （2）多组分的分析 （3）示差分光光度法——提高分析准确度 应用实例 （1）Folin — 酚法测定蛋白质含量 （2）考马斯亮蓝法测定蛋白质 补充：荧光分析法在生物学上的应用 测定细胞内钙离子浓度 细胞膜微黏度测定 研究酶的变构效应 细胞色素P450结构特征及其抑制剂的筛选 Thank you for attention * UV-VIS —— ultraviolet and visible spectrophotometry 分子光谱概述 电子光谱产生 仪器组成类型 应用实验技术 Ultraviolet-visible spectroscopy or ultraviolet-visible spectrophotometry (UV-Vis or UV/Vis) refers to absorption spectroscopy in the UV-visible spectral region. This means it uses light in the visible and adjacent (near-UV and near-infrared (NIR)) ranges. The absorption in the visible range directly affects the perceived color of the chemicals involved. In this region of the electromagnetic spectrum, molecules undergo electronic transitions(跃迁). This technique is complementary (补充) to fluorescence spectroscopy, in that fluorescence deals with transitions from the excited state to the ground state, while absorption measures transitions from the ground state to the excited state. E分子=E电子+E振动+E转动 △E电子＞△E振动＞△E转动 △ E = hv 比原子光谱复杂得多 带状光谱（包含电子、振动、转动光谱） 转动光谱（远红外光谱）：能级差0.005-0.05eV，吸收波长25-250μm的远红外光。 振动光谱（红外光谱）：能级差0.05-1eV，吸收波长1.25-25μm的红外光。此种跃迁包含了转动光谱。 电子光谱（紫外—可见吸收光谱）：能级差1-20eV，吸收波长0.06-12.5μm的紫外、可见光。此种跃迁包含了大量的振动、转动光谱，是为带状光谱。 转动 cm 级 微波 振-转 0.75-1000μm 红外 电子 200-400 紫外 电子 10-200 真空紫外 电子 光谱类型 400-750 波长（nm) 可见 辐射区域 ?-胡罗卜素 咖啡因 阿斯匹林 丙酮 The Beer-Lambert law states that the absorbance of a solution is directly proportional to the concentration of the absorbing species in the solution and the path length. Thus, for a fixed path length, UV/VIS spectroscopy can be used to determine the concentration of the absorber in a solution. It is necessary to know how quickly the absorbance changes with concentration. A UV/Vis spectrophotometer may be used as a detector for