类固醇激素合成急性调节蛋白对动物试验型脂肪肝的作用摘要.docVIP

类固醇激素合成急性调节蛋白对动物试验型脂肪肝的作用 摘要： 本课题采用类固醇激素合成急性调节蛋白以腺病毒作为载体，经小鼠尾静脉注射在小鼠体内过表达，通过检测肝组织中甘油三酯和胆固醇含量变化以及利用油红O染色方法制作肝组织冰冻切片检测脂肪含量变化，用以研究类固醇激素合成急性调节蛋白对动物试验型脂肪肝的作用。结果表明：注射含StAR基因病毒的小鼠肝组织中甘油三酯和胆固醇的含量较注射生理盐水组以及注射空载体组明显降低；并且利用油红O对肝组织冰冻切片染色显示其脂类物质明显较其它2组减少；实验表明StAR可减轻肝细胞中脂肪沉积。 关键词：类固醇激素合成急性调节蛋白 脂肪肝 甘油三酯 胆固醇 脂类物质 肝脏是脂类的合成、运转和利用的场所，并不大量贮存脂肪。当肝内脂肪的分解与合成失去平衡，或运出发生障碍时，脂肪（主要是甘油三酯和脂肪酸）就会在肝实质细胞内过量积聚。脂肪肝是指由于各种原因引起的肝细胞内脂肪堆积过多的病变。正常肝内脂肪占肝重的3％-4％，如果脂肪含量超过肝重的5％即为脂肪肝，严重者脂肪量可达40％-50％，脂肪肝的脂类主要是甘油三酯。脂肪肝一般可分为急性和慢性两种。急性脂肪肝类似于急性、亚急性病毒性肝炎，比较少见，临床症状表现为疲劳、恶心、呕吐和不同程度的黄疸，并可短期内发生肝昏迷和肾衰严重者可在数小时死于并发症，如果及时治疗，病情可在短期内迅速好转。病人各型高脂血症均可见，关系最密切的为高甘油三酯血症，常伴随于肥胖和糖尿病。无肥胖和糖尿病的高胆固醇血症对脂肪肝形成的影响不如高甘油三酯血症明显。高脂、甜食及酒精可同时诱发高脂血症和脂肪肝。临床上，肥胖、糖尿病和高脂血症等因素并存者更易诱发脂肪性肝炎和肝硬化。肥胖表现为身体内过多脂肪的堆积。它是长期能量过剩的结果，饮食和体力活动是调节能量平衡的两种途径。长期过量摄入高脂肪（油炸食品），高糖（甜饮料）的食物，缺少体力活动以及看电视过多（看电视减少活动时间，并且增加吃零食的机会，增加能量摄入）等都是肥胖形成的危险因素。肥胖的形成虽然与遗传因素有关，但目前大量肥胖儿童的出现，主要与我们生活的社会环境有关。社会和经济的快速发展，使我们更方便地能接触到高脂肪，高能量的食品，同时交通的便利，如家用小汽车的增加，出租车的使用，高层建筑的增加，以及可供儿童安全步行及玩耍的场地的减少等，都大大地减少了儿童游戏和活动的机会。为了儿童的健康发展，教育部门虽然重视减轻学生校内的课业负担， 但近年学生参加课外授课的时间大大地增加了。 这些因素使得学生运动时间比从前大大地减少，相反，静坐时间大大地增加了。诸如此类社会环境的改变，使得我们处在一个肥胖易于发生的环境。 目前因此，有着重要的理论意义和应用价值。均饲养于室温22℃，相对湿度55％的动物房，自由进食及饮水实验饲养于室温2℃，相对湿度55％的动物房，自由进食及饮水，适应环境周后开始实验。鼠随机分为、（）和组。·wwt），用SPSS11.5统计软件分析。 2.4、小鼠肝脏组织的油红O染色 2.4.1 小鼠肝组织冰冻切片的制备： 自尾静脉注射病毒140小时后取肝组织行冰冻切片，实验前饥饿（正常饮水）12小时（晚8点去掉饲料，次日上午8点处死小鼠取组织），采用20％乌拉坦腹腔注射(0.5-0.7ml/100g体重)全麻，0.9％的生理盐水心内灌注冲洗4％多聚甲醛固定约30min4％多聚甲醛固定过夜每片厚度为μm。s）表示，组间差异用单因素方差分析统计。 表1 血脂类别 C57BL/6J小鼠（mmol/L） apoE基因敲除小鼠（mmol/L） T-CHO 2.3193±0.1098 8.9609±0.6695** TG 0.9737±0.9540 1.5426±1.2979* LDL-C 1.4759±0.0663 7.4764±0.5941** HDL-C 1.9664±0.4290 0.5325±0.3143** 其中*P0.05 vs. C57BL/6J, **P0.01 vs. C57BL/6J。 2、利用甘油三酯检测试剂盒显示注射含StAR基因病毒后肝脏组织中甘油三酯的含量明显较其它2组降低 经尾静脉注射病毒140小时后，取小鼠肝组织，利用氯仿甲醇抽题肝脏中的脂类物质，通过甘油三酯检测试剂盒检测显示注射含StAR基因病毒的小鼠肝组织中甘油三酯的含量均较注射生理盐水组和空载体病毒组小鼠明显降低，其结果如表2和图1所示, 数据以均数(标准差（(s）表示，组间差异用单因素方差分析统计。 表2 组别 甘油三酯含量（mg/g·wwt） 胆固醇含量（mg/g·wwt） NS 11 35.91±9.08 4.31±0.70 Ad-CMV-EGFP 11 29.95±3.86 4.12±0.46 Ad-CMV-StAR 12 1