利用SSR分子标记对鹅掌楸自由授粉子代的父本分析.pdfVIP

利用SSR分子标记对鹅掌楸自由授粉子代的父本分析.pdf

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植物学通报Chinese Bulletin of Botany 2007, 24 (5): 590596, .研究论文. 利用SS R 分子标记对鹅掌楸自由授粉子代的父本分析 孙亚光, 李火根* 南京林业大学林木遗传与基因工程重点实验室, 南京 2 10037 摘要 利用自行开发的12个EST-SSR分子标记, 采用最大似然法对鹅掌楸(L.chinense (Hemsl.) Sarg.)实验群体3个半同胞 家系的180个子代进行父本分析。结果表明, 每个SSR位点的等位基因数为3-7, 平均为4 .67; 其平均观测杂合度(Ho)、平均 期望杂合度(He)及平均多态信息含量(PIC)分别为0.458、0.635和0.580 。利用12个SSR标记可在95%的可信度确定114个 子代的父本, 占子代群体的 63.3%, 其累积排除概率为98.52%。自由授粉状态下, 鹅掌楸的自交率为11.6%, 而北美鹅掌 楸自交率为0, 且种内交配比例大于种间交配。鹅掌楸平均有效花粉散布距离为20-30 m, 最大散布距离为70 m 。 关键词 鹅掌楸, 交配方式, 父本分析, 花粉流, SSR 孙亚光, 李火根 (2007). 利用SS R 分子标记对鹅掌楸自由授粉子代的父本分析. 植物学通报 24 , 590 596 . 花粉散布是植物基因流(gene flow)的重要组成因子, 的交配方式, 估算个体繁殖贡献率, 对于了解群体间或世 花粉有效散布距离及散布模式是影响植物有性繁育过程 代间的基因流及性选择适合度有重要的理论意义(张冬梅 及种群遗传结构的重要因素( Ha m ric k a nd Naso n , 等, 2003) 。目前, 亲本分析的统计方法大致归为3 类, 2000) 。早期花粉流的研究多采用花粉跟踪法, 一般应 即遗传排除法(genet ic exclusion) 、最大似然分析法 用荧光染色(Levin and Kerster,1974; Waser et al.,1996) (maximum likelihood analysis)和父性拆分法(fractional 和放射性同位素标记技术(Schlising and Turpin, 1971; paternity assignment) (陈小勇, 1999; 何田华和葛颂, Reincke and Bloom,1979), 通过对花粉的捕获或标记 2 0 0 1) 。 来定性地研究基因流, 但该法无法真实反映花粉的有效 木兰科(Magnoliaceae)鹅掌楸属(Liriodendron)现仅 散布模式。DNA 分子标记技术的发展为花粉流的研究 存2个种, 即鹅掌楸(L.chinense (Hemsl.) Sarg.)和北美 提供了强有力的工具。与RA PD 等随机引物分子标记 鹅掌楸(L. tulipifera L.) 。鹅掌楸因现存个体数少且处 相比, 共显性的分子标记, 如RFLP、SSR 和SNP 等 于片段化生境而被列为国家二级珍稀濒危保护树种。 能够检测出丰富的遗传信息, 表现出高度的稳定性、可 该属2个种虽然地理分布间隔遥远, 分布与生存状况截 靠性和高效性, 能够精确地估计群体遗传多样性和花粉 然不同, 但种间可配性高, 因而是植物系统进化、交配 散布模式, 是研究植物种群遗传结构、基因流及交配系 系统和基因流研究的理想材料(王章荣, 2005) 。关于鹅 统最理想的分子标记(Byrne et al., 1996; Streiff et al., 掌楸花粉流的分子检测, 国内曾有过报道(黄双全等, 1998,1999; Gerber et al., 2000) 。 1998), 但以往所用的分子标记为随机引物标记RAPD, 亲本分析是直接估算基因流的最常用方法之一 所得结果有很大的局限性。本文旨在以特异性的SSR (Snow and Lewis,1993) 。采用遗传标记研究种群及个 分子标记为工具, 通过父本分析研究鹅掌楸有效花粉散 体间的亲缘关系, 即判定种子或幼苗是由哪个个体自交 布模式, 为鹅掌楸交配系统研究及保护策略的制定提供 或哪两个个体杂交产生的。亲本分析能够描述群体内

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