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单纯疱疹病毒I型UL43基因体外表达及功能初步研究.pdf 82页

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暨南大学硕士学位论文 单纯疱疹病毒I 型UL43 基因体外表达及功能初步研究 Herpes simplex virus type I UL43 gene expression and preliminary study for the function 作者姓名: 史文俊 指导教师姓名 孙晗笑 及学位、职称: 博士 教授 学科、专业名称: 微生物与生化药学/基因组药物方向 论文提交日期: 二零一四年五月 论文答辩日期: 二零一四年六月 答辩委员会主席: 马文丽 教授 论文评阅人: 盲审1 盲审2 学位授予单位和日期: 暨南大学 二零一四年七月 独 创 性 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表 或撰写过的研究成果,也不包含为获得 暨南大学 或其他教育机构的学位 或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论 文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名: 签字日期: 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 暨南大学 有关保留、使用学位论文的规定, 有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和 借阅。本人授权 暨南大学 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名: 导师签名: 签字日期: 年 月 日 签字日期: 年 月 日 学位论文作者毕业后去向: 工作单位: 电话: 通讯地址: 邮编: 暨南大学硕士学位论文 中文摘要 目的: 体外构建 HSV-1UL43 真核表达载体,利用生物信息学分析结果,在体外对其表达的 蛋白质的功能进行初步研究,为探究UL43 编码蛋白质与药物作用的靶点打下基础。 方法: 1. 利用生物信息学 DNAStar 软件,Protpara 软件 soPMA 程序 ESyPred3D 程序 http://bp.nuap.nagoya-u.ac.jp/sosui/ ;http://mendel.imp.ac.at/sat/DAS/DAS.html 等网站 或程序对HSV-1UL43 遗传进化树和UL43p 结构和功能进行预测和分析。 2. 利用基因工程原理方法,构建HSV-1UL43 用于体外表达的T 克隆载体和真核表达 载体。 3. 构建HSV-1 膜融合过程中必要的四种基本糖蛋白 (gB,gD,gH-gL)T 克隆载体以 及真核表达载体。利用脂质体转染效应细胞,细胞免疫酶联分析,体外分析UL43p 在细胞到细胞膜融合过程中的作用。 结果: 1. HSV-1UL43 基因存在于α 和γ 类疱疹病毒中,并与猴类同源性较高,与同为人类 疱疹病毒的HHV-3 及HHV-8 同源性较低。但结构显示Prv UL43 同源性与HSV-1 较高。 2. HSV-1UL43p 中磷酸化位点较为丰富。UL43p 跨膜结构综合预测为 8 跨膜,与 PrvU

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