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斜生栅藻对重金属铅、铬胁迫的生理生化响应及其解毒效应.pdf 56页

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暨南大学硕士学位论文 斜生栅藻对重金属铅、铬胁迫的生理生化响应及其解毒效应 摘要 重金属污染已经成为目前全球关注的环境问题,微藻对重金属的胁迫较为敏感,同时 微藻能够吸收转运一定数量的重金属,它已成为水体环境监测和重金属污染防治的重要生 物材料。本文以BG-11 为基础培养基,以斜生栅藻为研究材料,从以下方面研究了斜生栅 藻对重金属铅和铬胁迫的生理生化响应及解毒效应: 1.以斜生栅藻为研究对象,以干重法、液相氧电极、XE-PAM 及酶活测定试剂盒等为 研究手段,研究了重金属 Pb2+ 、Cr3+ 和 Cr6+ 对斜生栅藻生物量积累、光合性能及抗氧化 系统的影响。结果表明:Pb2+ 、Cr3+ 和 Cr6+ 对斜生栅藻的半抑制浓度分别为82.94μmol·L-1、 -1 -1 2+ 121.15μmol·L 、23.65μmol·L 。半抑制浓度胁迫下,斜生栅藻的放氧速率分别在2-8 天(Pb 胁迫)、1-3 天(Cr3+ 、Cr6+ 胁迫)受到明显抑制,而呼吸速率无明显变化;Pb2+ 胁迫下, 斜生栅藻光系统Ⅱ (PS Ⅱ)的原初光能转化效率 (F /F ) 、实际光能转化效率(Yield )、 v m 相对电子传递速率(rETR )均明显低于对照,光化学淬灭(qP )从第1 天到第5 天高于对 照,而 6-8 天则显著低于对照;Cr3+和 Cr6+胁迫对斜生栅藻光合性能的影响不如Pb2+胁迫 明显。斜生栅藻丙二醛细胞 (MDA )含量在重金属胁迫下升高,以第3、4 天尤为明显; 超氧化物歧化酶(SOD)活性增加,于第3、4 天较为明显;过氧化氢酶(CAT )活性、总 抗氧化活性(T-AOC )在重金属胁迫下均有小幅度提升。通过本研究发现,斜生栅藻的生 物量、光合速率、叶绿素荧光参数和SOD 活性等指标对重金属的胁迫的响应均较为灵敏, 可作为评估重金属胁迫对微藻伤害的指标。 2. 以斜生栅藻为研究对象,通过ICP-MS 、qPCR 和HPLC 的分析,研究了在重金属离 子Pb2+ 、Cr3+ 、Cr6+ 的半抑制浓度胁迫下,斜生栅藻对这三种重金属离子的去除效果变化、 斜生栅藻植物络合素合成酶基因 (PCS )的表达及植物络合素含量的变化情况。结果表明: 在培养96 h 后,斜生栅藻对培养基中 Pb2+ 、Cr3+和Cr6+ 的去除率分别达到Pb (51.52% )、 Cr3+ (69.64% )、Cr6+ (70.86% ),去除率顺序为Pb2+<Cr3+ ≈Cr6+ 。在重金属离子Pb2+ 、Cr3+ 、 Cr6+ 胁迫下,斜生栅藻的PCS 基因表达量均不同程度升高,其中在前24 h ,PCS 基因的表 达量增加顺序为Cr6+>Cr3+>Pb2+ ;而在培养后2 天,PCS 基因的表达量增加顺序为 Pb2+ > Cr3+ > Cr6+ 。斜生栅藻的PCs 总含量也因不同重金属胁迫而呈现出差异性,其中增加量顺 序为 Cr3+ > Cr6+ > Pb2+ ,且均于第24 h 达到最大值298.05 nmol ·g-1、2203.26 nmol ·g-1、 473.97 nmol ·g-1,且达到最大值时的含量分别是对照组158.31 nmol ·g-1 的 1.88、13.91、2.99 I 暨南大学硕士学位论文 斜生栅藻对重金属铅、铬胁迫的生理生化响应及其解毒效应 倍。此外,三聚体 PC3 不能稳定的存在于斜生栅藻中。 由以上研究表明,斜生栅藻对不同重金属离子Pb2+ 、Cr3+ 和Cr6+ 的解毒效果不同,其 中对Cr3+ 、Cr6+ 的解毒效果优于Pb2+ ,且斜生栅藻受到受到Pb2+ 的胁迫是缓慢而长效的, 在胁迫后期能导致大量细胞死亡;Cr3+ 和 Cr6

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