牛瑟氏泰勒虫病动物模型及间接荧光抗体试验建立.pdfVIP

牛瑟氏泰勒虫病动物模型及间接荧光抗体试验的建立——摘要 摘 要 本试验首先选择了严重免疫缺陷(SCID)鼠作为实验动物模型研究对象， 细胞被牛红细胞所置换。给SCID小鼠人工感染牛瑟氏泰勒虫，通过血液涂片镜 检观察到在人工感染第4天末梢血液中出现了新增殖的牛瑟氏泰勒虫虫体，第 10～12天红细胞染虫率高达23％，并出现了与牛瑟氏泰勒虫病相似的贫血、血 红蛋白减少等症状，此后在小鼠血液中牛瑟氏泰勒虫逐渐减少。如果定期输入正 常牛红细胞，血液中虫体可持续25～30天。 在利用SCID鼠建立了牛瑟氏泰勒虫病动物模型的基础上，为了克服SCID鼠的 成本高；不易饲养管理，给试验带来不便。我们将昆明小白鼠主要免疫器官脾脏 摘除和高剂量、连续注射地塞米松也能达到抑制昆明小白鼠免疫功能的目的，使 牛瑟氏泰勒虫能感染给昆明小白鼠。昆明小自鼠人工感染牛瑟氏泰勒虫后的第8 天，用PCR方法能检测出特异阳性带；第14天在其末梢血液中出现少量虫体，红 细胞染虫率为0．8～3％。注射地塞米松后腹腔注入感染瑟氏泰勒虫的牛红细胞方 法组的昆明小白鼠红细胞内虫体出现时间和红细胞染虫率要比摘除脾脏组小白 鼠的早和高。 牛瑟氏泰勒虫病动物模型的建立，解决了抗原来源不足等问题。当SCID鼠 红细胞染虫率达到15％时，昆明小白鼠红细胞染虫率达到3％时，自心脏采集抗 7．2 凝血，用pH PBS洗涤、悬浮后，加于12穴免疫荧光载玻片，制各成免疫荧 光试验抗原片，建立了牛瑟氏泰勒虫病间接荧光抗体试验。结果表明，该法具有 特异性强、敏感性高、操作简单、反应快速等优点。对流行地区牛血清的检测结 果，牛瑟氏泰勒虫血清阳性率为87．50％(105／120)，而血液涂片染色镜检阳性 率为28：33％(34／120)，间接荧光抗体试验诊断方法远远高于血液涂片染色镜检 法。该法不仅可检出有临床症状的病牛，而且还可以检出隐性感染牛和带虫牛。 关键词：牛瑟氏泰勒虫病；严重免疫缺陷鼠；动物模型；间接荧光抗体试验 fluorescent animalmodelandthe methodsofindirect EstablishmentofTheileriosis diagnostic antibody—～Abstraet the Theileriosisanimalmodeland Establishmentof ofindirectfluorescent methods antibody diagnostic Abstract SeriousCombined Disease(SCID) This selected Immunodeficiency experiment animal the ofthe model，then ofthemouse-as researchingobject experimental normaloxred SCIDmice tothemethodsof the cell(ORC)intoaccording replaced that bloodcellhavebeen