卡氏肺孢子菌肺炎生物被膜的体内观察及其β-防御素的分布特征研究.pdfVIP

nt Acmetooacter oaurc Microbiol.2005,43(5):2~ 李先平，等。鲍曼不亏 )10,5(2): 86-90 chaP．HauschildT．eta】 (RNDfamily)effluxpl 卡氏肺孢子茵肺炎生物被膜的体内观察及其β-防御素的分 布特征研究 郑玉强1刘爱波1蒲瑜1 蔡辉2武卫华2叶彬2 1.重庆医科大学附属儿童医院临检中心，儿童发育疾病研究教育部重点实验室，儿科学重 庆市重点实验室，重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地 2.重庆医科大学病原生物教研室 [摘要]目的：研究鼠卡氏肺孢子菌肺炎(Pneumocystiscarinii，Pc)p-防御素的分布特征 和观察卡氏肺孢子菌生物被膜。方法：免疫抑制方法建立卡氏肺孢子菌肺炎动物模型，改良 四胺银 (GMS)染色和RT-PCR方法检测Pc病原体；银染色、过碘酸雪夫氏(PAS)染色 和扫描电镜观察Pc的生物被膜；RT-PCR方法检测鼠肺、肾、脾、小肠、皮肤、肝脏、心 以及血液8个组织的β1-防御素和β2-防御素的mRNA表达。结果：免疫抑制诱导第5周PCR 方法检测到Pc感染，第7周GMS染色观察到Pc包囊，第9周银染色、PAS染色和扫描电 镜观察到明显的Pc生物被膜。RT-PCR方法在肺、肾、脾、小肠、皮肤、肝脏、心以及血 液均检测到β1和β2防御素的mRNA表达，β1防御素在肾脏和皮肤表达最强，β2防御素在 肺表达最强。结论：Pc在体内可以形成生物被膜，可以诱导宿主p防御素的产生；卡氏肺 孢子菌肺炎肺部诱导的防御素以β2防御素为主。 [关键词]卡氏肺包子菌 ; 生物被膜 ; β-防御素 ; 鼠模型 Observethebiofidmandinvestigatethedistributionof β-DenfensinsinPneumocystiscariniipneumoniarat ZHENGYu-qiang1LIUAi-bo1PUYu1CAIHui2WuWei-hua2YEBin2 1.LaboratoryMedicine,ChildrensHospitalofChongqingUniversityofMedicalSciences, MinistryofEducationKeyLaboratoryofChildDevelopment,KeyLaboratoryofPediatricsin Chongqing,ChongqingInternationalScienceand TechnologyCooperrationCenterforChildDevelopmentandDisorders 2.DepartmentofPathogenBiology,ChongqingUniversityofMedicalSciences [ABSTRACT]Inordertoinvestigatethedistributionofβ-DenfensinsmRNAandobserve thebiofilmofPneumocystiscariniiinvivoofrat,P.cariniipneumonia(PCP)ratswereinduced withdexamethasoneinthisstudy.P.cariniiweredetectedby GMSstainsandreverse transcriptionPCR.ThebiofilmsofP.cariniiinvivowereobservedbysilverstain,periodic acid-schiff(PAS)stainandscanningelectronmicroscope(SEM).β-Defensin-Iandβ-Defensin-2 mRNAweretestedbyreversetranscriptionPCRinratlung,kidney,spleen,smallintestine,skin, liver,heartandbloodof8variousorgansandtissues.Th