苦参抗SLT-Ⅱe致RIMMVECs损伤机理及有效成分研究论文.pdfVIP

中国畜牧兽医学会·中兽医学分会·2007学术年会《论文集》 可以看出，槐花水煎液对RIMMVECs具有较强的毒性作用，在24h内，1．0 mg／mL以上的槐花剂 量组均可以明显抑制RIMMVECs的增殖，直到浓度为0．i meCmL才表现出对细胞的增殖作用。而 槐花各组对RI^nⅣECs分泌NO均高于空白组，但由于槐花水煎液本身具有一定的色泽影响，故 排除槐花1组、槐花2组。而从槐花3组、槐花4组的结果仍略高于空白对照组，结合槐花组对 细胞增殖率的试验结果，可以推测槐花对细胞NO的分泌呈微上调的趋势。而从槐花水煎液与SLT- IIe共同作用RIMMVECs后细胞增殖率的结果可以看出，在浓度为0．5mr／mE和0．05medmL时， 槐花水煎液明显的改善了因SLT-IIe作用而导致的细胞增殖抑制，表明槐花水煎液可以起到保护 能是由于槐花在该浓度下仍具有细胞毒性所致。而从NO分泌的角度来看，毒素+槐花3组表现出 明显的抑制SLT-IIe作用后细胞分泌NO增加的作用。槐花对NO分泌的调控与细胞增殖结果并 不完全一致，其对抗SLT-IIe、保护RIMMVECs的作用机理尚有待进一步研究。 参考文献 toitS N a1．Amutant toxinIIebound Gb3：structtn：eofa H，PannuS，BoodhooA，et Shiga·like receptor group 【1】Ling with II toxinaltered Fold Shiga-like bindingspecificity[J]．StructureDes，2000，15；8(3)：253-264 【2】曹庆森．中草药预防仔猪水肿病[J】．云南畜牧兽医，2000，1：44 【3】于船．中兽医学(第二版)口咽．北京：中国农业出版社．1979 苦参抗SLT．IIe致RIMMVECs损伤机理及有效成分研究 周传铎1吴军1刘钟杰卜索占伟2穆祥2李禹涛1段惠琴2 (1中国农业大学动物医学院，北京100094；2北京农学院动物科技系，北京102206) liketoxin，SLT-II 志贺样毒素II型变异体(Shiga e)主要由出血性大肠杆菌(EHEC)产生，为 intestinal 猪水肿病的主要毒力因子。试验研究表明，SLT-IIe能抑制大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(rat mucosamicrovascularendothelial cells。RllVlMVECs)的增殖，并可对其造成一定损伤。而适宜苦参 效成分进行研究，为中药对抗细菌毒素及防治细菌病的研究提供理论基础。 1．材料与方法 1．1材料 大鼠肠粘膜微血管内皮细胞(北京农学院中兽医实验室提供)：NO试剂盒(深圳品美)；ET-I(内 所有试剂均经过0．22pm孔径的滤膜过滤除菌。 1．2仪器 ． 克奥迪实业集团有限公司)；酶联免疫检测仪(BioRad)；分光光度计(uMco) 1．3方法 1．3．1细胞传代接种：选取第lO代的细胞进行消化，所得细胞液用完全培养基稀释，将细胞 密度调整到5×104个／mL，充分混匀后接种至96孔细胞培养板中，每个孔接种200“l，然后置 h。 入C02培养箱中静止培养48 ‘1．3．2分组方案：共分5组，每组5个重复(其中12h各细胞组在一块细胞培养板上)。分组 -．292． 中国畜牧兽医学会·中兽医学分会·2007学术年会《论文集》 及各组毒素与中药液终浓度如下。空白组：维持培养基；毒素组：维持培养基