利用5%27LongSAGE标签克隆蜜蜂全长cDNA5%27端长片段的研究论文.pdfVIP

蜜蜂生物学 t端长片段的研究“ 利用5·LongSAGE标签克隆蜜蜂全长cDNA5 孙亮先，谢宪兵 (分子生物学与药物化学福建省高等学校重点实验室；泉州师范学院，泉州362000) 和转录起始位点的新技术。本文报道了利用西方蜜蜂的5’LongSAGE标签序列作为 PCR上游引物，下游引物根据相应预测基因外显子设计，以RT—PCR克隆蜜蜂功能基 因全长cDNA完整的5t端长片段。研究获得了3个基因的cDNA片段。对RT—PCR产物 的序列分析结果表明所扩增的片段具有mRNA转录本的完整5’端。实验结果表明对蜜 t 蜂5LongSAGE文库大规模测序所获得的标签序列可作为快速克隆目的基因全长cDNA 的5-端的RT—PCR引物。 关键词：5’LongSAGE；标签序列；全长cDNA；西方蜜蜂；RT—PCR cDNA from of tags Generatinglonger fragments5longSAGE honeybees(卸／s．Mellifera) Sun Liang—xian，XieXian-bing and Labof Advanced Nomal (Molecular Education，Quanzhou BiologyPharmacologyKey Fujian University,Quanzhou，Fujian，362000) Abstract：The Serial ofGene recently Analysis developed5’Long a toolin initiationstart sitesfHS)in providedpowerfulidentifyingtranscription genomicsequence．A new of5’LS was inthis this 5’LS sequences tags reportedpaper．Ininvestigation，threetag application oftheWestern usedas ofRT-PCR．The honeybee(Apismellifera)wereup-streampalmers paired down—streamweredevised tothelastexonof predictedgenes． primers according corresponding ofRT-PCR demonstratethe cDNA Sequenceanalysis products amplifiedfragmentspossessed of indicatedour numberof 5’-endmRNA results integrated