纳米钕铁硼粒子的制备及其细胞毒性研究.pdfVIP

李建辉，等：纳米钕铁硼粒了的制备及其细胞毒性研究 纳米钕铁硼粒子的制备及其细胞毒性研究 李建辉1，谢占涛，钱军民，黄石，吕毅2 [摘要】目的：制备硅胶表面修饰的壳核结构纳米钕铁硼磁性材料，并评价其细胞毒性。方法：采 颗粒进行表面修饰，在其表面修饰合适层厚的Si02，红外分析仪分析验证；MTT染色法评价其对小鼠成 纤维细胞L929的增殖影响；Si02表面修饰纳米Nd．Fe-B颗粒与L929细胞共培养，细胞爬片HE染色和 TEM观察其入胞情况，以及细胞器的改变；取共培养之后的细胞进行传代培养，观察纳米Si02／Nd-Fe-B 颗粒代谢情况。结果：采用QM．3SP04行星式球磨机制备纳米钕铁硼粒子的合适参数为；磁粉29、正己 烷25ml、油酸0．35ml、球料比20：1、球磨时间40h。制各出纳米钕铁硼粒子粒径范围20--150nm。以KH550 为硅源，溶胶．凝胶法进行纳米钕铁硼粒子表面修饰的合适Si02溶胶浓度为3％，陈化时间2h，TEM检测 可见纳米钕铁硼颗粒表面均匀修饰一层厚度约为7rim的物质，红外分析证实其为si02。硅胶修饰纳米钕 铁硼微粒浸提液的细胞毒级为l级，其吸光度值与空白对照组相比无显著性差异(P0．05)；硅胶修饰纳 米钕铁硼微粒与L929细胞共培养，细胞爬片及TEM可见纳米粒子进入细胞内，在胞内分布于细胞浆， 细胞核中未见纳米粒子分布，TEM观察细胞线粒体轻微水肿，内质网扩张；传代培养发现3代内胞内纳 米粒子迅速减少。结论：高能球磨法可以用于制备纳米钕铁硼微粒，利用溶胶．凝胶法成功的对纳米钕铁 硼微粒进行表面硅胶聚合修饰，透射电子显微镜检测制各的壳核结构微粒其硅胶层均匀，厚度适中。硅胶 生物相容住良好，可以增加纳米钕铁硼应用于人体的安全性。MTT法检测合成的壳核结构纳米钕铁硼微 粒浸提液的细胞毒性，证实其毒性轻微，符合国家GB／T16886《医疗器械生物学评价》标准中医用植入 性材料的细胞毒性要求标准。壳核结构纳米钕铁硼微粒可以通过胞吞作用进入细胞，并且细胞毒性轻微， 细胞增殖能力未受明显影响。 [关键词]磁吻合；纳米钕铁硼；高能球磨法；表面修饰；纳米毒性 近年来关于新型生物复合材料的研究一直是国际上材料学的研究热点，关于纳米磁性材 料的研究逐年倍增，我们基于在外科吻合技术方面和材料学领域的前期研究，结合纳米磁性 材料最新进展，提出了合成一种新型生物可降解纳米磁性复合材料，期望能够应用于可降解 磁性吻合器的研制，实现胆道和大血管的可降解磁力压榨式吻合，最终实现手术吻合的“无 缝线化，’。本研究针对合成满足要求的复合材料的关键步骤——高性能纳米磁性粒子的制备、 修饰及细胞毒性评价展开研究。 1材料与方法 1．1采用高能球磨法制备纳乡I∈Nd-Fe-B微粒，应用QM．3SP04行星式球磨机，按球料比、 作者简介：‘李建辉，男，西安交通大学医学院第一附属医院．Email：lijhmd(毡163．com．2吕毅，通讯作者，男，西安交通大学 材料学院，Email；luyil69(蛰126．com． 32 2010中国博上后生命科学学术论坛 油酸含量和球磨时问设计不同球磨方案，球料比选用10：1、20：1、30：1，大小球比例l：6：球 磨时间分6h、20h、40h、54h；油酸含量为磁粉质量的7．5％、15％和30％；正己烷(分散剂) 25ml，磁粉含量29，球磨转速360r／rain。寻找合适的球磨参数，TEM对球磨产物进行粒径分 析。 1．2采用溶胶．凝胶法对制备的纳米Nd．Fe-B微粒表面修饰Si02，以制备壳核结构纳米 coated Iron Nd-Fe-B微粒(SiliconNeodymium 硅源，在酸性环境下水解制备溶胶后，加入离心后的纳米N(1-Fe．B微粒混匀后陈化，TEM检 测表面修饰Si02厚度，红外分析仪分析其表面修饰物。 1．3MTT法测定纳米Si02／Nd．Fe．B微粒的细胞相对增殖率和细胞毒性 (1)设4个实验组：A组：10％胎牛血清DMEM培养液，作为空白对照；B组：聚乙烯 浸提液，作为阴性对照；C组：含0．64％苯酚的培养基，作为阳性对照；D组：纳米Si02／Nd．Fe．B 微粒浸提液。 (2)根据L929细胞生长标准曲线可知，L929细胞最佳接种浓度为1．O×l叫孔，用10％ 胎牛血清DMEM培养液制备此浓度单细胞悬液，接种于3块96孔板，每组接种7孔，每孔100u