强精煎对实验小鼠睾丸bcl-2、Baz蛋白表达影响的研究论文.pdfVIP

2009世界中医男科掌术大会 ●男性不育● TSCPA基因的表达特征。TSCPA蛋白的在小鼠和人睾丸中的分子作用机制，以及其与其他蛋白质之间 的关系需要进一步研究。可采用RNAi119]或基因敲出技术来揭示TSCPA基．[]在小鼠和人精f发生过程 中的牛物学功能。本研究是TSCPA基因功能特征研究的基础，有助于阐明雄性哺乳动物生殖中的分子 事件。 强精煎对实验小鼠睾丸bcl-2、Bax蛋白表达影响的研究 宾彬1，莫秋柏2，陈定雄1，黄彬1，徐杰新1，王杰2，崔锦珠1 (1．广西中医学院第一附属医院，南宁530023；2．广西中医学院研究生院，南宁530002) 只成年健康雄性小鼠随机分成窄白组、模型组、强精煎组和黄精赞育胶囊组各20只。采用环磷酰胺 腹腔注射建立小鼠生精障碍模型。在造模结束后第一天开始给药至实验结束，按不同组别分别予以 灌胃给药，黄精赞育胶囊混悬液0．4ml、强精煎冲剂0．4ml、正常组与模型组分别给予等量的蒸馏水， 剂量为0。4ml／次／鼠，1次／天，连续30天。第3l天行手术取睾丸，行HE染色，显微镜下观察各组 果：与模型组相比，正常组、强精煎组和黄精赞育胶囊组睾丸生殖细胞凋亡基因Bax蛋白表达显著降 正常组、强精煎组和黄精赞育胶囊组各组问相比较睾丸牛殖细胞凋亡基因Bax、Bcl一2蛋白表达、 达与及Bcl一2／Bax比值密切相关。 [关键词]强精煎：凋11：基因Bc卜2、Bax．Bcl一2／Bax 随着环境污染、不良生活方式等闪素的影响加重，人类的生育能力日趋下降，不育症已成为一 种常见病症。在育龄期约有10％一15％的夫妇有某些不育问题，而男性凶素占不育症病因的30％一50％…。 男性／fi育症将成为危害人类健康生活甚至人类生存的疾病。本实验通过建立睾丸牛精障碍动物模型， 探讨补肾健脾为主辅以清热利湿、祛瘀解毒的中药强精煎对生精障碍小鼠睾丸的生殖细胞凋I=与 Bcl-2／Bax基因表达的关系。 1材料和方法 1．1实验动物分组健康育龄雄性昆明种小鼠体重(33±2．58)g，由广西医科大学实验动物中心提供， 许可证号：SCXK桂2003—0003。采用随机数字表法随机分为正常组、模型组、黄精赞育胶囊组、强 精煎组，各20只。 1．2药品及试剂强精煎(经验方，主要由：菟缝子、枸杞子、益母草、黄芪、当归、党参、牡蛎、 神曲等中药组成)，采用单昧中药配方颗粒(免煎中药，由江苏省江阴市天江药业有限公司生产，批 号：0803193)；黄精赞育胶囊(由何首鸟、黄精、菟丝子、枸杞子、五味子、熟地黄等组成，上海 新亚药业邗江有限公司生产，批号：080101)。环磷酰胺注射液，江苏恒瑞医药股份有限公司生产， 记长臂生物素的羊抗兔IgG、亲和素、过氧化物酶)及底物DAB显色试剂盒，均购自武汉博士德生 149 2009世界中医男科学术大会 ●男性不育● 物工程有限公司。 1．3动物模型的建立小鼠驯化喂养1周后，除正常组外，采用环磷酰胺腹腔滓射致小鼠生精障碍 模型。每次按40mg／kg*d1体重注射，每日一次连用5天旧1，腹腔注射5次即可成模。 1．4给药计量与方法 在造模结束后第一天开始给药军实验结束，按不同组别分别予以灌胃给药，黄精赞育胶囊混悬 的成人用量)。空自组与模型组分别给予等量的蒸馏水，剂量为0．4M／次／鼠，1次／天，所有实验动 物均以正常饲料喂养直至实验结束，灌胃30天。 um厚切片，行HE染色，显微镜下 1．5睾丸形态学变化睾丸经l占1定、脱水、透明、浸蜡、包埋，4 观察各组睾丸形态学变化。取己制备HE染色片每张切片在400倍光镜卜．随机选取5个视野进行分析， 通过睾丸组织的病理观察，对精予的发生障碍作出定性判断，通过Johnsen的10级积分法对精予发 生及精子发生障碍的程度作出定量判断。 1．6免疫组化免疫组化法检测睾丸Bcl一2、Bax的表达，严格按照试剂盒操作步骤进行。镜下细胞 质与细胞核棕黄色为阳性染色，每张切片在400倍光镜下随机取5个4i茕整视野，在每个视野数出 总细胞数和阳性细胞数，计算出阳性细胞率(阳性细胞数／总细胞数×100％)，